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目的 测试并比较柠檬提取物0#及3#在不同的实验方法下对新城疫病毒和柯萨奇病毒B3的灭活作用;测试并比较柠檬提取物0#及3#对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌四种菌的抑菌作用。
方法 直接灭活作用:将新城疫病毒和柯萨奇病毒B3分别与柠檬提取物0#和3#体外作用1h,然后加入到培养好的Vero细胞中,作用1h后吸出弃去,加入维持液,培养72h。预防作用:将不同浓度的柠檬提取物0#和3#分别加入培养好的Vero细胞中作用24h,吸出弃去,然后分别加入新城疫病毒和柯萨奇病毒B3,作用1h后吸出弃去,加入维持液,培养72h。治疗作用:将新城疫病毒和柯萨奇病毒B3分别加入培养好的Vero中,作用1h,吸出弃去,然后分别加入0#及3#,培养72h。三种方法与未加柠檬提取物的病毒液对细胞的作用相比较,通过CPE法观察对病毒的作用。将活化好的四种菌制备菌悬液,进行计数。取0.2ml菌液滴入制备好培养基的平皿中,用涂布器涂布均匀,放于操作台上20分钟。将柠檬提取物0#及3#稀释成不同浓度,并分别滴在制备好的滤纸片上,每片滴10μl,放在已涂布好菌液的培养基上,每个滤纸片间间隔18mm,每个培养皿中放2-5个滤纸片,标记后放入36℃温箱中培养1天,观察测量抑菌圈直径大小。
结果 在柠檬提取物0#对新城疫病毒的直接灭活作用中,实验组较对照组有显著性差异(p<0.05);在柠檬提取物3#对柯萨奇病毒B3的预防作用中,实验组较对照组有显著性差异(p<0.05);在柠檬提取物0#及3#对新城疫病毒和柯萨奇病毒B3的治疗作用中,实验组与对照组间无显著性差异(p>0.05)。柠檬提取物0#对四种菌均出现抑菌圈。柠檬提取物3#对大肠埃希菌、铜绿假单胞菌出现抑菌圈,对金黄色葡萄球菌和白色念珠菌没有出现抑菌圈。
结论 柠檬提取物0#对新城疫病毒具有灭活作用;柠檬提取物3#对柯萨奇病毒B3具有预防作用;0#及3#对新城疫病毒和柯萨奇病毒B3均无治疗作用。柠檬提取物0#对四种菌均有抑菌作用,尤其对金黄色葡萄球菌的抑菌效果最强。柠檬提取物3#对大肠埃希菌和铜绿假单胞菌具有抑菌作用,对金黄色葡萄球菌和白色念珠菌无抑菌作用。