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[目的]本研究旨在证明,纳洛酮(naloxone)在体外可以抑制细菌内毒素脂多糖(LPS)诱导的视网膜小胶质细胞的活化,并减少后者分泌的肿瘤坏死因子(TNF-a)和白介素1β (IL-1β)。并且进一步阐述,上述作用是通过抑制p38MAPK这一通路实现的。[方法]将SD大鼠的视网膜小胶质细胞分离纯化培养。用不同浓度的LPS处理,建立小胶质细胞体外激活模型。不同浓度的naloxone (0.5μM,1.0μM和2.0μM)在LPS激活视网膜小胶质细胞前,预处理30分钟。利用ELISA检测胶质细胞培养上清中TNF-a和IL-1p的分泌量。利用westernblot方法,检测细胞中MAPK通路家族中三个亚家族p38MAPK, ERK, JNK,以及他们活化的形式磷酸化p38MAPK (P-p38),磷酸化ERK (P-ERK),磷酸化JNK (P-JNK)这六种物质的含量。通过免疫荧光的方法,标记OX42(小胶质细胞特异性标记物)和P-p38。利用p38MAPK特异性的抑制剂,SB203580(不作用于ERK, JNK.通常被用来排除p38MAPK的作用)预处理视网膜小胶质细胞12小时,之后再进行上述naloxone预处理,LPS激活这些步骤。利用ELISA再次检测上清液中TNF-α和IL-1p的分泌量,来反向验证我们的推论。[结果]实验证明naloxone可以减少LPS诱导的TNF-α和IL-1β释放,并呈浓度-效应关系。Naloxone可以有效的减少p38MAPK的磷酸化,而对于ERK, JNK的磷酸化并无作用。对于SB203580处理后的小胶质细胞,naloxone的预处理则不能改变LPS诱导的TNF-α和IL-1β释放增加。[结论]Naloxone可以抑制小胶质细胞激活和释放炎性因子,这一现象可能是通过对p38MAPK通路实现的。