【摘 要】
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准确、快速地检测体系中磷酸根含量的传感器在实验室分析、临床医学、生物发酵、食品检验、环境监控等领域具有重要的意义。本工作制备并研究了麦芽糖磷酸化酶(MP)—葡萄糖氧
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准确、快速地检测体系中磷酸根含量的传感器在实验室分析、临床医学、生物发酵、食品检验、环境监控等领域具有重要的意义。本工作制备并研究了麦芽糖磷酸化酶(MP)—葡萄糖氧化酶(GOD)双酶膜用于磷酸根的检测。在磷酸根生物传感器的研究中,双酶的固定化与适宜的测试溶液环境是两个关键问题。因此,开发适宜的酶固定基体及相应的固定方法制备双酶膜,并有效保持酶的活性。此外,寻找能实现准确检测磷酸根的适宜测试溶液环境,对于磷酸根生物传感器的发展具有重要意义。本工作采用硝酸纤维素膜为基体固定双酶,制备了双酶膜,构筑磷酸根电化学生物传感器,并研究了其对磷酸根的检测性能。论文包括以下内容：以硝酸纤维素膜为基体,采用戊二醛蒸汽交联法固定MP与GOD,制成酶膜。通过测定不同制备条件下酶膜对于磷酸根的响应,确定该酶膜的最佳制备条件为：磷酸缓冲溶液的pH值为6.5 (0.05 M), GOD的滴涂量为5 U,MP的滴涂量为6 U(酶膜有效直径约为6.4 mm)。该酶膜的最佳测试条件为：含有10 mmo1·L’麦芽糖,400 mmo1·L-12-羟基吡啶的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液(0.1 mo1·L-1,pH=6.5)。实验研制的MP-GOD双酶膜对磷酸根具有良好响应,灵敏度为4.24 nA(mmol/L),线性范围为0.5-6.0 mmol-L-1,响应时间为3 min。实验表明,该MP/GOD双酶具有良好的选择性、重现性和操作稳定性。
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