小鼠肾髓质中小管与血管的走行及毗邻关系研究

• 作 者: 杨杰
• 机 构: 中国医科大学
• 出 处: 中国医科大学
• 发表日期: 2017年期
• 关键词: 三维重建 免疫组化 肾髓质 血管束 渗透梯度 动物模型

目的:肾髓质可分为外髓与内髓两部分。肾外髓存在血管束和束间区两个明显分区。其中，血管束主要由直小血管下降支与上升支组成，血管束之间的各结构组成束间区。因此，肾外髓中小管与血管的走行及毗邻关系主要表现为血管束与束间区各结构的走行及空间排列关系，其与肾髓质渗透梯度的产生与维持密切相关。但在内髓，明显的血管束结构不易辨别。虽然，近年来关于肾髓质的研究有所进展，但对髓质内各结构的走行与毗邻关系尚存在不同的观点。因此，本研究将三维重建技术与传统组织学方法相融合，髓质横向结构与纵向结构相结合，探索小鼠肾髓质中小管与血管的走行及毗邻关系，理解其在髓质渗透梯度产生与维持中的意义，同时也为肾损伤以及肾脏修复的治疗与预防方法提供结构基础。　　研究方法:　　1、小鼠肾外髓内带小管与血管数字追踪及三维可视化　　获取成年小鼠肾组织2.5微米厚的连续树脂切片，甲苯胺蓝染色后，进行拍照、图像配准及数字追踪。　　2、树脂切片免疫组织化学染色　　在三维重建肾单位及血管走行的基础上，在肾外髓，每隔50微米取原始切片，制备成0.5微米厚的半薄切片，采用改良的免疫组织化学方法，进行小鼠肾组织功能蛋白AQP-1的检测。　　3、AQP-1与CD34、AQP-2与CD34免疫组织化学双标染色　　选择5微米厚石蜡切片，进行AQP-1与CD34、AQP-2与CD34的免疫组织化学双标染色。亮视野下观察直小血管、降支细段及集合管的形态及排列关系，暗视野下观察髓质中各结构的毗邻关系，并拍照。　　结果:　　1、每一个血管束中的直小血管下降支都由来自不同肾小球的出球微动脉延伸而来，一个血管束可接受8个肾单位的血液供应。小鼠肾外髓中，直小血管下降支与上升支、短髓襻肾单位的降支细段与直小血管上升支相伴走行在血管束中，而在内髓，直小血管上升支与直小血管下降支、长髓襻肾单位的降支细段、集合管相伴走行，伴行结构中液体流动方向相反，构成了“逆流”结构。　　2、在血管束的最大横截面，上行结构的总数与下行结构近似相等，并且血管束内各结构占总数的比例不同，所占比例从大到小依次为直小血管上升支、短髓襻肾单位的降支细段、直小血管下降支、长髓襻的升支粗段。　　3、血管束内直小血管在走行的过程中会不断分支与汇合。　　结论:小鼠肾髓质中，上行有孔的直小血管上升支分别与下行的直小血管下降支、小管降支细段、集合管紧密伴行，构成髓质中小管液逆流交换的装置，是髓质中渗透梯度形成从而浓缩尿液的重要结构基础。