论文部分内容阅读
目的本研究通过腧穴“解郁方”治疗抑郁症模型大鼠,对比模型组与针刺组大鼠海马重量的变化、ERK通路中Ras蛋白含量的变化、海马中神经细胞的变化,从宏观上研究腧穴“解郁方”对抑郁症模型大鼠海马重量的影响,从微观上研究腧穴“解郁方”对海马ERK通路中Ras蛋白和神经元的影响,探讨腧穴“解郁方”治疗抑郁症的机理,为临床上推广腧穴“解郁方”治疗抑郁症提供更多可靠的实验室依据。方法先通过旷场试验挑选出水平运动次数加垂直运动次数之和在30-120次的大鼠,其余的剔除,然后将30只SD大鼠随机分为3组,每组10只。A组:空白组;B组:模型组;C组:针刺组。A组作为空白组,不做任何处理;B组、C组开始接受三周不同的应激刺激:冷水游泳(4℃,5min)、禁水(24h)、禁食(24h)、昼夜颠倒(24h)、热烘(45℃,5min)、束缚(3h),夹尾(3min)。上述应激刺激每天随机选择1种,每种应激方式平均使用3次。针刺组C组从造模开始后就进行治疗,穴位常规消毒后,用华佗牌0.25mm×25mm针灸针进行针刺,使用SDZ-II电针仪加强刺激。使用电针仪不可过度刺激大鼠导致其挣扎、嘶叫,总的来说以穴位周围皮肤轻微颤动为宜,电流宜保持在2mA以下,留针20min,1次/天,共治疗21d;A组不给予应激刺激和针刺治疗,B组只采取应激刺激而不给予针刺治疗。实验结束后,通过对海马形态的观察、重量的测定,得出抑郁大鼠各项实验室数据比较结果;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组大鼠RAS蛋白含量的变化;在光镜下观察各组大鼠海马内神经元细胞的变化。结果1.从各项行为学指标我们可以看到:实验前空白组、模型组、针刺组大鼠在体重、糖水消耗量、旷场试验方面显示无明显差异(p>0.05)。(1)21天后体重变化:与A组(空白组)比较,B组(模型组)大鼠的体重均明显下降(P<0.01);与B组(模型组)比较,C组(针刺组)大鼠体重均显著上升(p<0.01)。(2)21天后,糖水实验情况:与A组(空白组)相比,B组(模型组)大鼠的糖水消耗量明显降低(P<0.01);与B组(模型组)相比,C组(针刺组)大鼠的糖水偏爱度显著升高(p<0.01)。(3)实验结束后,旷场试验情况:与A组(空白组)相比,B组(模型组)大鼠水平运动和竖直运动评分明显下降,结果有显著差异(P<0.01);与B组(模型组)比较,C组(针刺组)大鼠水平运动和竖直运动均显著增高(P<0.01)。2.针刺腧穴“解郁方”对应激模型大鼠海马影响情况如下:与空白组比较,模型组海马重量减轻但无统计学意义(p>0.05),但Erk通路中ras蛋白含量降低,结果有显著性差异(P<0.01),组织学观察可见神经细胞减少;与模型组比较,腧穴“解郁方”组Erk通路中ras蛋白含量降低,结果有显著性差异(P<0.01),组织学观察可见海马神经细胞减少相对较少。结论1.针刺腧穴“解郁方”能够明显改善大鼠的抑郁症状。2.就本实验而言针刺腧穴“解郁方”对大鼠海马重量有影响,但尚无统计学意义。3.应激刺激后模型组大鼠海马内神经细胞显著减少,而针刺组大鼠海马内神经细胞的减少相对较少,因此可推断针刺腧穴“解郁方”对大鼠海马内神经细胞具有保护作用。4.应激刺激后,大鼠海马内Ras蛋白含量明显增高、Ras-Erk通路过度激活,针刺腧穴“解郁方”可以降低抑郁大鼠海马内Ras蛋白含量、抑制Ras-Erk通路的过度激活。综上所述,腧穴“解郁方”治疗抑郁症的机制可能与保护海马内神经细胞、降低抑郁大鼠海马内Ras蛋白含量和抑制Ras-Erk通路的过度激活有关。