聚乙二醇1000维生素E琥珀酸酯修饰脂质体作为阿霉素载体的研究

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聚乙二醇1000维生素E琥珀酸酯(TPGS)分子结构有亲水基团和亲油基团而有表面活性,且因其独特的性质,TPGS被用作增溶剂、乳化剂、吸收促进剂以及控制药物释放的载体,TPGS还能够抑制P-gp蛋白和增加抗肿瘤药物如阿霉素、长春碱和紫杉醇的毒性因而被广泛应用应用于药剂学中。本研究中,用硫酸铵梯度法制备TPGS修饰的阿霉素脂质体,并对其理化性质和普通脂质体做了比较。用阳离子交换树脂吸附法测定药物包封率,用透析法测定其体外释放,透射电镜观察脂质体形态,激光粒度测定仪测定粒度分布和Zeta电势,并考查了脂质体稳定常数Ke、药物泄漏率以及胎牛血清对脂质体粒度的影响。结果表明TPGS修饰的脂质体形态规整,药物包封率大于95%,TPGS修饰后能显著提高脂质体的贮藏以及在血清中的稳定性,大大降低药物泄漏率,而体外释放快于普通脂质体。以SD大鼠为受试动物研究比较了TPGS修饰的阿霉素脂质体与游离药物和普通阿霉素脂质体的血浆药代动力学。用DAS2.1.1非房室模型处理药动学数据并计算药动学参数。结果表明脂质体的血药浓度时间的特性与游离药物完全不同,AUCO-24h显著增加,V0-24h显著减小。另外通过对比TPGS修饰的脂质体和普通脂质体,表明修饰脂质体的AUCO-24h大于普通脂质体,但是MRTO-24h/于普通脂质体。研究了各种剂型对MCF-7细胞和MCF-7/ADR细胞摄取实验和体外毒性。发现TPGS修饰的阿霉素脂质体较游离药物和普通阿霉素脂质体促进了阿霉素在MCF-7/ADR细胞中药物摄取,但是在MCF-7细胞中,游离药物组的细胞摄取最高。值得一提的是,在MCF-7/ADR细胞的摄取实验中,用蔗糖外液制备的阿霉素脂质体中的药物摄取比用HBS外相介质细胞药物摄取高1倍。在细胞毒性实验中,表明了TPGS能够提高了阿霉素对MCF-7和MCF-7/ADR的毒性,也表明了TPGS在耐药逆转中发挥作用。最后,以荷H22瘤ICR小鼠为动物模型,评价了各剂型的在体抗肿瘤药效。以尾静脉给与生理盐水的小鼠组为阴性对照,分别在接种肿瘤的第5,7,9,11天给予5mg/kg等剂量的阿霉素的各药物剂型。相对于游离阿霉素和普通阿霉素脂质体组,TPGS修饰的阿霉素脂质体显示了更强的肿瘤生长抑制能力并显著的降低了给药小鼠的肿瘤重量,结果表明其提高了阿霉素的抗肿瘤药效。
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