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目的:探讨建立人卵巢癌皮下瘤裸鼠模型的最佳方案。
方法:先培养人卵巢上皮性腺癌细胞株SKOV-3,用细胞悬液接种法制备荷瘤鼠模型1只;再大批量培养SKOV-3细胞,以三种不同细胞剂量(2×106个/只、5×106个/只及1×107个/只)的细胞悬液对裸鼠进行皮下接种及套管针组织块接种法进行皮下接种;观察成瘤情况,每周测量肿瘤长、短径,计算肿瘤体积,绘制肿瘤生长曲线,取瘤组织进行病理学检查。
结果:在5×106个/只细胞悬液接种组和套管针皮下组织块接种组成瘤率均为100%;在2×106个/只细胞接种组和1×107个/只细胞接种组成瘤分别为40%和60%;肿瘤形成潜伏期以细胞接种组较长,为13~16天,而组织块接种组为7~10天。
结论在用人卵巢癌细胞SKOV-3建立皮下瘤裸鼠模型的实验中,当所建样本量不多时,用5×106个/只细胞悬液接种和套管针组织块接种均为理想方法。在建立较大样本量动物模型时,选用套管针组织块接种法为最佳方案。
目的:探讨Topotecan(拓扑替康)能否增强Ⅰ型单纯疱疹病毒胸苷激酶(herpessimplexvirustypeⅠthymidinekinase,HSV1-tk)/丙氧鸟苷(ganciclovir,GCV)自杀基因系统对卵巢癌的体内杀伤效应。
方法:用携带tk基因的重组逆转录病毒转染人卵巢癌细胞系SKOV-3,用含有G418的培养液筛选获得抗性克隆细胞(命名为SKOV-3/TK)。PCR方法检测HSV1-tk基因整合情况。用两种方法建立荷皮下瘤裸鼠模型,一种为单用SKOV-3细胞皮下接种,另一种是将SKOV-3细胞与SKOV-3/TK细胞按8:2比例混合进行皮下接种。于接种半月后,分别从两种接种方法中选取肿瘤大小基本一致的模型进行实验。以前一方法接种者按随机方法分为对照组和Topotecan单因素处理组,以后一种方法接种者按随机方法分为HSV1-tk/GCV单因素处理组和HSV1-tk/GCV+Topotecan联合因素处理组。卡尺测量肿瘤大小,绘制肿瘤生长曲线,取瘤称重,计算抑瘤率,并做瘤组织病理学检查。
结果:Topotecan组、HSV1-tk/GCV组及HSV1-tk/GCV+Topotecan联合因素处理组抑瘤率分别为25.3%、38.8%及89.7%。各组瘤重与对照组比较,差异均有统计学意义,P<0.05,而且联合因素组与两单因素组比较差异亦有统计学意义,P<0.05。病理结果显示实验组瘤组织出现不同程度点、片状坏死,并伴有炎细胞浸润,以联合因素组为重。结论HSV1-tk/GCV自杀基因系统对卵巢癌有较强的杀伤作用;HSV1-tk/GCV系统联合Topotecan治疗卵巢癌可起到协同作用。