输注供体未成熟树突状细胞对大鼠皮肤移植的影响

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目的建立稳定的大鼠皮肤移植排斥反应模型,探讨输注供体未成熟树突状细胞减轻排斥反应和诱导免疫耐受的作用。方法通过建立大鼠自体皮肤移植模型,熟练掌握大鼠皮肤移植方法。继而用改良的方法扩增未成熟树突状细胞:rhG-CSF,5μg/kg,皮下注射,连续7天后,从骨髓分离、提取树突状细胞,体外培养3d。实验分组:自体移植组、对照1组SD→Wistar、对照2组Wistar→Wistar、和imDC实验组SD→Wistar,配对组合皮肤移植。于皮肤移植术中经阴茎背静脉输注供体未成熟树突状细胞5×10~6个,动态观察术后移植皮肤的存活时间,不同组别移植物病理改变,探讨供体imD减轻大鼠皮肤移植免疫排斥反应的作用。结果1、全部自体移植皮片至观察终点(>2月)仍然存活,移植皮片与周围组织愈合良好,无缺损或破溃,色泽与周围组织无明显区别。移植物表皮及附属毛发、毛囊生长良好。术后14d镜下观察移植物病理切片可见:各组织层次清晰完整,皮肤附属结构完好,可以看到完整的毛囊结构,细胞结构完好,无明显的炎性细胞浸润。2.对照1组,移植皮片在14天内全部被排斥掉,排斥反应发生早,且严重。移植物的平均存活时间仅为11.8±1.6d,最短者于术后第9d完全排斥。3.对照2组:Wistar→Wistar组,虽然移植物最终全部被排斥,但排斥反应发生晚且较轻,平均生存期为23.1±2.4d。移植物最长存活27d,最短存活19d。术后14d镜下移植物病理切片表现:移植物组织结构不完整,附属结构被破坏,未见正常毛囊结构,可见部分坏死灶,有大量炎细胞浸润。于高倍镜下可见组织细胞核溶解、碎裂。4.实验组,全部移植物在25d内被排斥,存活时间最短14d,平均存活时间为19.3±3.4d,最短14d。术后14d镜下移植物病理切片表现:移植物组织结构遭破坏,可见坏死灶,有大量炎细胞浸润。于高倍镜下可见组织细胞核溶解、碎裂。结论使用供体imDC预处理受体鼠可以显著延长移植物的存活时间,减轻排斥反应。
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