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三氧化二砷(As2O3)是中药砒霜的主要有效成分,不仅对急性早幼粒白血病疗效显著,对实体瘤也有着较好的抑制作用。然而As2O3在体内半衰期较短,给药后会被快速清除；此外高剂量的As2O3对肝肾衰竭等毒副作用,限制了其在临床上的应用。因此我们考虑构建三氧化二砷肝靶向药物体系,使As2O3能够直接靶向肝癌肿瘤部位并在肿瘤细胞内部实现药物的释放,提高治疗效果。本文首先将聚乙二醇(PEG)及乳糖酸(LA)通过共价偶联的方法接枝到具有较好生物相容性、可生物降解、无毒的天然聚阳离子化合物壳聚糖(CS)上,制备可靶向肝癌肿瘤细胞且能够躲避被单核巨噬系统(MPS)清除的正电荷材料PEG/LA-CS(PLC)。采用红外光谱(FTIR)和元素分析对PLC结构进行分析,结果表明mPEG、LA可成功接枝到壳聚糖上,接枝率为11.73%。采用稳定荧光光谱及透射电镜(TEM)对PLC的自聚集行为进行考察：采用电化学阻抗频谱图(EIS)考察PLC对BSA的吸附作用,表明PLC对BSA的吸附量较少。同时采用荧光光谱、紫外光谱(UV)及圆二色光谱(CD)考察PLC对BSA蛋白结构的影响,所有数据都说明BSA在PLC溶液中的蛋白结构不发生改变。此外,PLC具有较好的血液相容性,可有效延迟血浆复钙时间40%以上,抗凝血性能良好,溶血率小于5%,符合生物医用高分子材料的使用要求。选择可生物降解、细胞相容性良好的聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)作为药物载体材料,通过双乳化-溶剂挥发法(W/O/W)将药物As2O3包封到PLGA纳米粒内部,制备肝肿瘤靶向As2O3-PLGA/PLC药物缓释纳米粒。采用正交实验系统考察实验过程中多个实验因素对纳米粒合成的影响。通过对实验结果的综合分析,得到的最优实验条件为：内外相油水比为20：1；PLGA浓度为30mg/mL; PLC浓度为1 mg/mL;乳化剂(Poloxamer)浓度为9%(w/v)。优化所得到的As2O3-PLGA/PLC纳米粒粒径为187.2±10.6 nm,分散系数(PDI)为0.197±0.008,电位为28.9±0.3 mV,包封率达91.68%±1.42%,载药量为72.0±1.24%,在5天内对药物的释放可达72.83%。为了了解As2O3-PLGA/PLC NPs的抗肿瘤性能,对纳米粒的体内抗肿瘤性能和体外抗肿瘤性能分别进行研究。使用CCK-8法考察纳米粒对肝细胞LO2和肝癌细胞SMMC-7721的抑制作用。结果表明,As2O3-PLGA/PLC NPs对SMMC-7721细胞具有明显的抑制作用,并且该抑制作用依赖于时间和药物浓度,随时间的延长及药物浓度的增大,抑制效果增强,作用72h后药物的半抑制浓度IC50为0.47±0.017μg As2O3/mL,远低于纯As203制剂(0.96 ±0.033μg As2O3/mL)。同时我们选择HEPG-2细胞注射雄性BALB/c裸鼠腋区皮下建立动物肿瘤模型考察As2O3-PLGA/PLC NPs体内抗肿瘤性能。数据表明,As2O3-PLGA/PLC NPs能够抑制肿瘤的生长,在一个试验周期结束后,As2O3-PLGA/PLC NPs治疗组小鼠肿瘤体积为1.602±0.524 mm3,远低于生理盐水模型组(2.262±0.546 mm3)。此外,As2O3-PLGA/PLC NPs能够提高As203应用的安全性,降低对肝脏及肾脏器官的毒副作用。