【摘 要】
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糙颈露螽属和华绿露螽属隶属于昆虫纲、直翅目、益斯科、露螽亚科。这两个属的物种对环境变化极为敏感,是重要的生态指示种,对于环境和生物多样性的保护具有特殊的意义。另外,这两个属在中国东洋区物种多样性尤为丰富,并且在我国横断山区和青藏高原东缘地区具有非常高的特有性,对研究露螽亚科昆虫的区系和分类学研究非常重要。早在19世纪,国外昆虫学家就已经开始了对露螽的研究,并发表了很多专著和区系性的论著。但我国对于
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糙颈露螽属和华绿露螽属隶属于昆虫纲、直翅目、益斯科、露螽亚科。这两个属的物种对环境变化极为敏感,是重要的生态指示种,对于环境和生物多样性的保护具有特殊的意义。另外,这两个属在中国东洋区物种多样性尤为丰富,并且在我国横断山区和青藏高原东缘地区具有非常高的特有性,对研究露螽亚科昆虫的区系和分类学研究非常重要。早在19世纪,国外昆虫学家就已经开始了对露螽的研究,并发表了很多专著和区系性的论著。但我国对于露螽亚科的研究工作还较少,相比国际上露螽亚科的研究工作较为滞后。我国昆虫学者对露螽亚科未进行整体全面的分析,更未深入探索露螽亚科属间和属内系统进化关系。本研究首次对露螽亚科中具有代表性的两个属进行分子系统学研究。该研究填补了对露螽亚科属内系统进化关系研究的空白,并对露螽亚科的深入研究起到了指引和推动作用。本研究使用常规PCR、降落PCR、梯度PCR相结合的方法,测定了糙颈露螽属、华绿露螽属和外群5个属的65个个体的部分线粒体基因和核基因序列。对所测的基因序列进行生物学分析,并利用贝叶斯的方法构建系统进化树,从而探究两个属与外群属及属内的物种系统发育关系。主要结果如下：1.对无水乙醇浸泡的标本和多年保存的干标本,均可提取出一定量的DNA模板,并可满足PCR扩增和测序的要求。但在DNA的提取时,应注意温度和机械损伤有可能造成模板的降解。2.本实验测定了六个线粒体基因（COX1、COX2、COX3、ND1、16SRNA、12SRNA）和三个核基因（H3、ITS1、ITS2）的基因序列。实验总共获得3750bp线粒体基因和1090bp核基因序列。3.在线粒体蛋白编码基因的饱和性分析中,密码子的第三位碱基均呈现饱和现象；在碱基组成中,线粒体基因AT含量为60%,表现出AT偏好性,核基因GC含量均为55%,则表现出GC偏好性；在遗传距离分析中,除华绿露螽属的核基因表现出较小的遗传距离外,其它物种和基因的遗传距离均较大4.与单基因树结果相比,多基因联合数据分析结果更可靠,更能真实反映物种间的系统进化关系。联合数据的贝叶斯树表明,本实验所研究的两个属与外群属明显分开,形成独立一支,支持这两个属的单系性。5.在糙颈露螽属内基本形成,（（（西藏凸翅糙颈露螽）+（近凸翅糙颈露螽+凸翅糙颈露螽））+（（污翅糙预露螽）+（宽叶糙颈露螽+（截叶糙颈露螽+褐足糙颈露螽））））的系统进化关系。在华绿露螽属内基本形成,(西藏华绿露益+(（中华华绿露螽+（折板华绿露螽+特突华绿露螽））+（（长裂华绿露螽+华绿露螽新种）+（海南华绿露螽+（侧反华绿露螽+近小华绿露螽+等刺华绿露螽）））的系统进化关系。6.在两个属内部,西藏地区的物种均位于树枝基部,且形成独立一支。表明青藏高原的隆起使得物种间形成了地理隔离,从而导致物种间的独立进化。7.在华绿露螽属内部呈现多个新种聚集为一支的现象,说明物种的形成存在爆发性形成模式。另外四川华绿露螽作为一个广域种,散布于整个属内分支,表明了基因渗透在物种形成和物种进化过程中起到了很重要的作用。
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