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目的：研究1,25二羟维生素D3[1a,25-DihydroxyvitaminD3;1,25-D]和塞莱昔布(celecoxib;CELE)影响阿霉素(doxorubicin;ADM)对乳腺癌细胞株MCF/ADR的作用及其作用机制与NF-κB的关系。 方法：采用四唑氮蓝比色(MTT)法检测1,25-D和CELE对MCF/ADR细胞的作用及ADM的半数药物抑制浓度(IC50);采用流式细胞技术分析1,25-D和CELE作用于乳腺癌细胞株MCF/ADR细胞后,对细胞凋亡和细胞内ADM累积的影响;罗丹明标记抗体检测1,25-D和CELE对MCF/ADR细胞膜表面P-糖蛋白表达的影响;免疫组化SP法检测1,25-D和CELE作用于MCF/ADR细胞后NF-κB/p65蛋白和IκBα蛋白的表达水平。 结果： 1.1,25-D和CELE对MCF/ADR细胞的作用 1,25-D和CELE抑制MCF/ADR细胞的增殖,且具有时间和浓度依赖性,两药联合使用时呈现协同抑制作用。 2.1,25-D和CELE增强ADM对MCF/ADR细胞的作用 ①1,25-D(50nmol/L)和CELE(25umol/L)作用于MCF/ADR细胞后,ADM的IC50明显降低(P<0.01),1,25-D、CELE联合用药组与1,25-D或CELE单药组之间有统计学差异(P<0.01)。 ②1,25-D联合CELE和ADM作用72h后MCF/ADR细胞的早期凋亡率显著提高,与1,25-D或CELE单药联合ADM组和单用ADM组凋亡率相比差异有显著统计学意义(P<0.01); ③1,25-D和CELE均降低了MCF/ADR细胞表面P170蛋白的表达,增加了细胞内ADM的浓度,两药联合作用强于1,25-D或CELE单药作用(P<0.01)。 3、1,25-D联合CELE对NF-κB活性的影响 免疫组化结果提示ADM促进P65蛋白的表达,抑制IkB-α的表达;与细胞对照组和ADM组相比,1,25-D联合CELE组的p65蛋白表达水平降低,IκBα的表达增高,抑制了ADM引起NF-κB的活化(P<0.05)。 结论： 1.1,25-D和CELE抑制MCF/ADR细胞增殖、促进了MCF/ADR细胞的凋亡,两者联合用药时较1,25-D或CELE单药效果更佳。 2.1,25-D联合CELE和ADM作用于MCF/ADR细胞后,降低了ADM的IC50和细胞表面P170蛋白的表达,细胞内ADM含量也较未加药物处理时明显升高,明显逆转该细胞株对ADM的耐药性。 3.1,25-D联合CELE增强ADM对乳腺癌耐药细胞的作用,可能机制为1,25-D和CELE抑制NF-κB的活化,促进细胞凋亡。