花烛离体快繁关键技术及再分化有关机理探讨

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本研究以花烛(Anthurium andraeanum)品种‘Jolanba’、A1、B1为材料,研究了无菌培养体系的建立、无菌苗的复壮与培养体系的更新、试管苗的炼苗移栽,建立了‘Jolanba’离体培养体系。以‘Jolanba’再分化差异显著的三种愈伤组织为材料,从内源激素的协同调节等方面探讨了花烛再分化的有关生理生化机理。以‘Jolanba’8种不同培养时期或不同激素处理的愈伤组织为材料,探讨了花烛离体形态发生途径和8种愈伤组织离体形态差异的解剖学特点。应用RAPD技术探讨了花烛品种间亲缘关系与品种离体再生能力的相关性。 结果表明: 不同花烛品种间离体形态发生能力差异极显著,依次为:‘Jolanba’>A3>A1、A9>B1、B2。‘Jolanba’愈伤组织诱导的最佳外植体为红棕色的初展叶或刚转绿的成熟叶,部位以叶片基部为宜;愈伤组织诱导的培养基成分组合为1/2macro+BA 1.0mg/L+2,4-D 0.1mg/L+3%蔗糖;接种方式以叶片正面朝上为宜。适宜的芽诱导培养基为MS+0.5mg/L BA+NAA 0.1mg/L。 外源激素浓度应随花烛继代次数的增加而逐步降低至0;活性炭对再生芽的复壮有较显著效果。无菌苗的茎尖最适宜作为‘Jolanba’培养体系更新中愈伤组织诱导的外植体;诱导愈伤组织的培养基为1/2macro+BA 1.0mg/L+2,4-D 0.1mg/L;芽诱导培养基为Ms+TDZ 0.01mg/L。 移栽苗采用高约3cm、带2~3条长0.5~1cm的根、最大叶宽0.8cm以上的健壮试管苗;移栽基质为珍珠岩或泥炭土+珍珠岩(2:1)。 再生芽的分化需要较高水平的可溶性蛋白质,而再生芽的生长则需要较高水平的可溶性糖。POD和SOD活性与分化的芽数呈正相关。GA(1+3)/ABA、ZRs/ABA的高比例与再生芽的高度呈显著的正相关;IAA/ABA与花烛离体根发生成较好的正相关。 花烛‘Jolanba’的离体形态发生途径以不定芽途径为主,同时也有低频率的体细胞胚发生。8种愈伤组织在结节的类型、分生细胞的数量及分布等方面存在差异。 花烛品种间亲缘关系与品种离体再生能力有较好的相关性。 本文中花烛离体培养体系的更新及TDZ对该过程中芽分化的作用,从生理生化和解剖学水平探讨花烛再分化机理和特点,以及应用RAPD技术探讨花烛品种间亲缘关系与品种离体再生能力的相关性等创新性研究,国内外尚未见相关文献报道。
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