【摘 要】
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海洋微生物生存环境特殊,其次级代谢产物化学结构新颖、种类繁多,是新活性先导化合物的重要来源。为了寻找抗肿瘤活性先导化合物,本论文采用活性追踪的方法开展了海洋微生物
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海洋微生物生存环境特殊,其次级代谢产物化学结构新颖、种类繁多,是新活性先导化合物的重要来源。为了寻找抗肿瘤活性先导化合物,本论文采用活性追踪的方法开展了海洋微生物抗肿瘤活性代谢产物的研究工作。内容包括:海洋微生物抗肿瘤活性菌株的分级组合筛选;活性菌株复筛和发酵条件考察;抗肿瘤活性成分的追踪分离;化合物单体的结构解析;单体化合物抗肿瘤活性的初步评价。 采用海虾生物致死法和tsFT210细胞的流式细胞术筛选模型,以细胞周期抑制和细胞凋亡诱导以及坏死性细胞毒为活性指标,对采自青岛近海由实验室分离保藏的164株海洋微生物,进行了抗肿瘤活性的分级组合筛选。经海虾生物致死法一级初筛,得到活性菌株60株(LC50<500μg/mL),阳性率为36.6%。对初筛有效的60株菌利用流式细胞术筛选模型进行二级复筛,得到具有抗肿瘤活性的菌株27株,阳性率为复筛菌株数的45.0%、初筛菌株总数的16.5%。 本论文选择3株代谢产物活性强、稳定性好的放线菌H1002和007株,以及真菌H1-04作为目标菌株,对其活性产物进行了研究。通过培养基选择试验,发酵时间试验,确定了3株目标菌的大量发酵条件。经大量发酵和萃取实验分别得到了3株目标菌的活性部位,反复运用薄层层析,正相、反相硅胶柱层析,LH-20凝胶柱层析,反相高压液相等化学的分离纯化手段,采用小鼠乳腺癌tsFT210细胞的镜检结合流式细胞术的活性追踪模型,通过活性成分的跟踪分离,从H1002的代谢产物中分离得到12个化合物单体（1-12）;从007中得到了6个单体化合物（4、7、8、13-15）;从H1-04中分离得到12个单体化合物（16-27）。 继而,通过解析波谱数据并结合理化常数阐明了26个化合物的化学结构（化合物结构及名称参见Table 1）,其中生物碱类化合物9个(吲哚咔唑类生物碱化合物2个,喹唑啉生物碱类化合物6个,其他生物碱类化合物1
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