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1.临床研究1.1目的:对142例支气管哮喘(bronchial asthma,BA)患者进行中医证候学调查,探求哮喘中医证候分布规律,为哮喘的中医辨证分型和临床治疗提供理论依据。1.2方法:参考资料制定哮喘证候表,结合哮喘控制测试(ACT)评分及哮喘控制情况表,对符合条件的142例哮喘患者的资料利用统计软件对相关因素进行分析,总结哮喘中医证型分布规律。1.3结果:142例哮喘患者中寒哮证共有65例(所占比例45.77%),哮喘易感体质以阳虚质和痰湿质为主,分别占比35.91%和32.39%,说明哮喘的发病与体质因素相关。2.实验研究1.1目的:观察哮喘平冲剂对哮喘模型大鼠细胞因子IL-17、Notch信号通路的影响,探讨哮喘平冲剂治疗哮喘的免疫机制及分子机制。1.2方法:将84只健康雄性的SD大鼠随机分为7组:正常对照组、哮喘模型组、泼尼松西药组、金水宝中成药组,哮喘平冲剂低、中、高剂量组,每组12只,常规喂养7天后开始造模。致敏2次,以卵蛋白(Ovalbumin,OVA)喷雾激发,每日1次,共激发5周。雾化造模结束后中药低、中、高剂量组予以哮喘平冲剂、西药组予以泼尼松、中成药组予以金水宝胶囊灌胃治疗,正常组、模型组予以等量生理盐水灌胃,每天一次,连续2周。其中,中药高剂量组予以0.625g/kg/d为给药剂量(相当于成人的12.5倍),中药中剂量组予以0.313g/kg/d为给药剂量(相当于成人的6.25倍),中药低剂量组予以0.157g/kg/d为给药剂量(相当于成人的3.13倍),西药组予以0.313g/kg/d为给药剂量,中成药组予以0.313g/kg/d为给药剂量。两周后取材检测血清及肺泡灌洗液IL-17的含量,免疫组化检测Notch信号通路Notch1-4的表达,探讨哮喘平冲剂对哮喘治疗的机制。1.3结果:1.3.1大鼠血清IL-17含量:与正常组相比,模型组大鼠血清IL-17含量显著高于正常组(P<0.01)。与模型组相比,各治疗组大鼠血清IL-17含量均降低(P<0.01)。西药组与中药高剂量组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。中成药组与中药低剂量组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。中药中剂量组、中药高剂量组大鼠血清IL-17含量均低于中成药组(P<0.05)。1.3.2大鼠肺泡灌洗液IL-17含量:与正常组相比,模型组大鼠肺泡肺泡灌洗液IL-17含量显著高于正常组(P<0.01)。与模型组相比,各治疗组大鼠肺泡肺泡灌洗液IL-17含量均降低(P<0.01)。西药组与中药高剂量组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。中成药组与中药低剂量组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。中药中剂量组、中药高剂量组大鼠肺泡灌洗液IL-17含量均低于中成药组(P<0.05)。1.3.3免疫组化检测各组大鼠肺组织Notch1-4表达:与正常组相比,模型组肺组织Notch1、Notch2平均光密度值显著高于正常组(P<0.01);与模型组相比,治疗组各组肺组织Notch1、Notch2平均光密度值均降低(P<0.01);中药高剂量组与西药组比较,差异无统计学意义(P>0.0 5),中药中剂量与中药低剂量比较,Notch1、Notch2平均光密度值有所降低(P<0.05);中药低剂量与中成药组比较,差异无统计学意义(P>0.0 5)。与正常组比较,模型组Notch3平均光密度值有增高(P<0.05),其余各组肺组织中Notch3平均光密度值均明显减弱,且两组间比较无明显差异(P>0.0 5)。Notch4平均光密度值在各组中均无明显增高。1.3.4 RT-PCR检测肺组织Notch1-4 mRNA表达:与正常组相比较,模型组肺组织Notch1、Notch2 m RNA表达显著高于正常组(P<0.0 1),与模型组相比较,治疗组各组肺组织Notch1、Notch2 m RNA表达均降低(P<0.0 5),中药高剂量组与西药组比较,差异无统计学意义(P>0.05),中药中剂量组Notch1、Notch2 m RNA表达较中药低剂量组降低(P<0.0 5),中药低剂量组与中成药组比较,差异无统计学意义(P>0.0 5);Notch3 m RNA在模型组及对照组各组肺组织中表达均减弱,两组比较无差异(P>0.0 5)。Notch4m RNA在模型组肺组织及对照组肺组织中均表达不明显。3.结论:3.1在所研究的142例哮喘患者中证型以哮喘冷哮证居多。3.2哮喘平冲剂治疗哮喘的免疫机制可能是抑制白细胞介素-17(IL-17)的产生,从而减轻气道炎症;治疗哮喘的分子机制可能是通过下调Notch信号通路中参与T细胞分化与激活的Notch1、Notch2的表达,从而延缓哮喘的气道重塑。