小鼠Myosin Ⅹ基因启动子的分析鉴定

来源 :东北师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:initialD2004
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肌球蛋白X(Myosin X,Myo X)是最近发现的一种仅表达于脊椎动物中的非传统的肌球蛋白,分子量为240kDa左右。最近的研究表明,在大脑的发育过程中还表达一种分子量为165kDa左右的Myo X,同全长的Myo X相比,它同样具有三个PH结构域(pleckstrin homology domain),一个MYTH4结构域(myosin-tail homology4 domain)和一个FERM(band-4.1/ezrin/radixin/moesin)结构域,但缺少头部动力区,完全被5’UTR(480bp)取代。这两种不同形式的MycX是Myo X基因的不同的转录产物。   为了分析Myo X基因的转录调控机制,我们分别选取全长和无头Myo X基因ORF(蛋白编码框)的5’侧翼区.2000bp,对它们进行了生物信息学的分析,并且成功的构建了荧光素酶报告基因质粒pGL3-FM(-1835/+314)和pGL3-HM(-1667/+327)。通过对它们在293细胞系中的荧光素酶活性检测分析,我们发现两者都具有启动子活性,但是无头Myo X5’侧翼区-2000bp的序列的启动子活性相对于全长的较弱。接着我们对全长和无头Myo X的启动子进行了截短突变,发现他们的核心启动子区位于靠近转录起始位点的500bp内。为我们进一步研究Myo X的转录调控机制奠定了基础。
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