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脂多糖(LPS)是革兰氏阴性菌的细胞壁成分,是TLR4和TLR2的共同配体,同时也是病原分子相关模式物(PAMP)的典型代表。作为一种内毒素,它能够诱导机体产生与感染革兰氏阴性菌相同的免疫应激过程。本研究中采用耳缘静脉注射一定量的LPS,模拟母兔自然状态下感染革兰氏阴性菌时的免疫应激过程。旨在研究革兰氏阴性菌感染对母兔下丘脑、卵巢和输卵管中TLR4、TLR2以及其下游免疫细胞因子IL-1β、IL-6和TNF-α表达的影响。通过荧光定量PCR检测TLR4、TLR2、IL-1β、IL-6以及TNF-α的转录水平,利用ELISA检测IL-1β、 IL-6以及TNF-α的蛋白表达量。荧光定量PCR结果显示:下丘脑、卵巢和输卵管中均有TLR4、TLR2、IL-1β、 IL-6和TNF-α的转录,注射生理盐水后TLR4各个时间点转录水平与0h相比差异不显著(P>0.05), TLR2在下丘脑中6h和输卵管中3h显著高于0h(P<0.05),各个组织中1.5-12h,免疫细胞因子的转录水平与Oh相比没有显著变化(P>0.05);LPS诱导后,与0h相比TLR4转录水平仅在卵巢中显著增加(P<0.05),在输卵管中1.5h、3h和12h显著低于0h(P<0.05),而TLR2转录水平在下丘脑中3h和卵巢中12h显著高于0h(P<0.05), IL-1β转录水平在下丘脑中1.5h、3h和12h,卵巢中1.5-12h和输卵管中6h显著高于0h(P<0.05),IL-6在下丘脑中1.5-12h,卵巢和输卵管中1.5-3h显著高于0h(P<0.05),TNF-α在下丘脑中1.5h、3h和12h,卵巢中1.5h和输卵管中1.5-3h显著高于0h(P<0.05);实验组与对照组相比,TLR4转录水平仅在卵巢中12h显著高于对照组(P<0.05),TLR2在下丘脑中3h显著性高于对照组(P<0.05),6h显著低于对照组(P<0.05),卵巢中12h显著高于对照组(P<0.05),而输卵管中3h显著低于对照组(P<0.05), IL-1β转录水平在注射后下丘脑中1.5h、3h和12h,卵巢中3-12h和输卵管中6h显著高于对照组(P<0.05),Ⅱ-6转录水平在下丘脑中1.5-12h,卵巢和输卵管中1.5-311显著高于对照组(P<0.05), TNF-α转录水平在下丘脑中1.5h、3h和12h,卵巢中1.5h和输卵管中1.5-311显著高于对照组(P<0.05)。ELISA检测免疫细胞因子浓度显示:下丘脑、卵巢和输卵管中均有IL-1β、IL-6和]TNF-α蛋白的表达,对照组中,IL-1β和IL-6浓度在注射生理盐水后各个组织中1.5-12h的表达与0h相比没有显著变化(P>0.05),而在注射后TNF-α浓度在输卵管中3-12h显著低于Oh (P<0.05); LPS诱导后,IL-1β浓度在下丘脑中1.5-12h,卵巢中1.5-6h,输卵管中1.5h和6h显著高于Oh(P<0.05),IL-6浓度在卵巢中3h和输卵管中6h显著高于Oh(P<0.05),TNF-α浓度在下丘脑中3-6h和输卵管中1.5-12h显著低于Oh(P<0.05);实验组与对照组相比,IL-1β浓度在下丘脑中1.5-12h,卵巢中3-6h,输卵管中1.5h和6h显著高于对照组,IL-6浓度在下丘脑中12h,卵巢中3h,输卵管中6h显著高于对照组(P<0.05),TNF-α浓度在输卵管中1.5h显著低于对照组。总体上说下丘脑、卵巢和输卵管中均有TLR4、TLR2的表达,但LPS诱导后,TLR4转录水平仅在卵巢中显著增加(P<0.05),TLR2转录水平在下丘脑和卵巢中有显著增加(P<0.05),而IL-1β、IL-6和TNF-α的转录水平在下丘脑、卵巢和输卵管中均显著增加(P<0.05),但IL-1β、IL-6和TNF-α对LPS免疫应激在不同器官存在差异:下丘脑对LPS引起的免疫应激反应快,持续时间长;卵巢和输卵管的免疫应激反应慢,持续时间短。