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本文为了进一步研究甲亢大鼠腹主动脉和股动脉的变化,采用含左旋T4的药物(优甲乐)灌胃建立大鼠甲状腺功能亢进(甲亢)模型,观察甲亢大鼠的心率、收缩压、心脏和甲状腺组织学改变以及测定血清T3、T4浓度值;血管环功能实验来测定大鼠腹主动脉、股动脉收缩反应性和舒张反应性,以探讨L-T4对动脉血管的效应。
研究方法:
1.动物模型建立:每天以两种不同剂量(HT1组:每只200μg/天;HT2组:每只100μg/天)的优甲乐灌胃,定期记录大鼠的心率(尾动脉脉搏)、收缩压、体重,放免法测定大鼠血清T3、T4,取大鼠心脏、甲状腺称重及HE染色做组织病理检查;
2.离体血管环血管反应性测定:用两根不锈钢丝(直径0.05mm)穿过血管环内腔,钢丝的一端连在肌肉张力换能器(JZ-BK,贝科公司)上,收缩与舒张反应性用台式自动平衡记录仪(XWTD464型,上海大华仪表厂)记录,钢丝的另一端与微型推进器相连,调节推进器,使血管环能自由伸缩,血管环应该完全浸入到装有Krebs缓冲液10ml的血管槽中,缓冲液保持37℃,并连续供给95%O2-5%CO2混和气体。在血管槽中,用梯度浓度的KCl(10-90mM)和苯肾上腺素(PE,10-9Mto10-4M)累积浓度来测定血管环的收缩反应性[1,2],在完成KCl和PE血管环收缩反应性实验后,允许血管环分别有15分钟和60分钟的张力恢复时间,以使血管环重新获得最适静息张力。在恢复期,每5-10分钟换一次Krebs液。在完成KCl和PE药物实验后,再先后进行内皮依赖的血管舒张剂乙酰胆碱(ACh)和非内皮依赖的血管舒张剂硝普钠(SNP)的血管环药物实验,在实验前,先用5×10-7MPE分别预收缩血管环,然后向灌流槽中加入累积浓度的ACh(10-9Mto10-4M)和SNP(10-9Mto10-4M)[1,2]。在完成ACh血管环舒张反应实验后,允许血管环有30分钟时间恢复其最适静息张力。在恢复期,每5-10分钟换一次Krebs液。
研究结果:大鼠的血清T3、T4水平(HT1组:T3,3.8±1.3μg/L,T4,145.2±8.8μg/L;HT2组:T3,2.6±0.4μg/L,T4.105.2±7.1μg/L)较对照组(T3:1.4±03μg/L;T4:54.3±6.2μg/L)明显升高(p<0.01),该组动物的心率(HT1组:542±18次/min;HT2组:510±20次/min)、心脏体重比(HT1组:4.12±0.57mg/g;HT2组:4.10±0.32mg/g),心肌细胞横经(HT1组:43.12±3.70μm;HT2组:42.00±2.70μm)也显著高于(P<0.05)对照组(368±23次/min;2.67±0.35mg/g;20.85±1.30μm)。两个甲亢组和对照组相比,由氯化钾(10mM~90mM)和苯肾上腺素(10-9M~10-4M)激发的两种动脉血管的收缩反应显著降低(P<0.05);在5×10-7M苯肾上腺素预收缩条件下,由乙酰胆碱(10-9M~10-4M)和硝普钠(10-9M~10-4M)引起的舒张反应则显著强于对照组(P<0.05);两个甲亢组大鼠的腹主动脉与股动脉对KCl、PE的收缩反应的敏感性(EC50)均比对照组增强(P<0.05),而对ACh和SNP的舒张反应的敏感性(IC50)和对照组相比无差别。
研究结论:用L-T4灌胃法建立大鼠甲亢模型快速、有效;血清高甲状腺激素水平可使动脉血管的收缩反应减弱、舒张功能增强,这些变化可能在甲亢大鼠心血管功能的变化中发挥重要作用。