益眼明口服液对干眼小鼠的角膜及泪腺炎症因子表达的影响

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目的:研究益眼明口服液对干眼小鼠模型干眼症状改善情况,以及对干眼小鼠的泪腺及角膜的部分炎症因子(IL-1 β、IL-4、TNF-α)的RNA及蛋白表达的影响。方法:将30只健康C57/BL6小鼠平均分为5组,分别为正常组、模型组(包括:干眼+口服生理盐水对照组、干眼+高剂量组益眼明口服液组(320μ1/kg)、干眼+中剂量组益眼明口服液组(160 μJ1/kg)及干眼+低剂量组益眼明口服液组(80μ1/kg)。正常组为未给予任何处理的健康C57/BL6小鼠。其余模型组中的干眼症小鼠造模给予单侧下肢皮下注射浓度为1mg/m1的氢溴酸东莨菪碱0.5m1,每天注射4次(9点,12点,13点,16点),左右两侧交替进行,连续10天。选用小鼠泪液分泌量、角膜荧光素染色实验作为评估小鼠干眼症状指标的依据。对照组给予生理盐水口服14日。模型组中分别按低剂量、中剂量、高剂量组别给予80μ1/kg、160 μ1/kg、320μ1/kg按体重计算不同剂量益眼明口服液治疗,每日两次,共14日。并比较各组之间的临床疗效。结果:1.正常组泪液分泌试验分别为6.04±0.07 mm/min,对比组、低剂量组、中剂量组及高剂量组分别为 3.90±0.09mm/min、3.73 ± 0.06mm/min、3.80±0.05mm/min及3.86±0.02mm/min,正常组与对比组、低剂量组、中剂量组及高剂量组比较,差均有统计学意义(均P<0.05)。而在对比组、低剂量组、中剂量组及高剂量组之间行组间比较,差均不具有统计学意义(P>0.05)。证明使用东莨菪碱造模的干眼小鼠造模成功。2.各实验组小鼠治疗14日后,各项观察指标(泪液分泌量实验、角膜荧光素染色评分)较对比组进行比较,差异具有统计学差异(P<0.05)。证明益眼明口服液能促进干眼小鼠模型的泪液分泌,并减轻干眼症状,说明益眼明口服液对干眼小鼠模型具有治疗效果,从而证明益眼明口服液对干眼症具有治疗作用。3.在泪腺及角膜炎症因子IL-4、IL-1 β、TNF-α的RNA方面来说,高剂量组的RNA表达量小于对比组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。说明高剂量益眼明口服液对IL-4、IL-1 β、TNF-α的RNA表达均有抑制作用。各个实验组在IL-4的RNA含量均小于对比组RNA含量,差异均具有统计学意义(P<0.05)。可能说明不同剂量的益眼明口服液对泪腺及角膜炎症因子IL-4的RNA表达均具有抑制作用。4.从炎症因子IL-1 β、TNF-α的蛋白表达水平上来讲。各实验组的蛋白表达量均小于对比组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。说明各剂量益眼明口服液对IL-1 β、TNF-α的蛋白表达均有抑制作用。各个实验组在IL-4的蛋白表达量平均量小于对比组,但差异均不具有统计学意义(P>0.05)。说明高剂量益眼明口服液对干眼小鼠模型的泪腺及角膜炎症因子IL-1 β、TNF-α从基因表达水平上均具有抑制作用,在对IL-I β、TNF-α的蛋白表达均有抑制作用,但在IL-4的蛋白表达量作用不明显。5.PAS染色可见,对照组及各实验组的干眼小鼠模型结膜降部杯状细胞数量明显较正常组诚少。且以三个实验组的结膜降部杯状细胞数量相互对比,可见高剂量组>中剂量组>低剂量组>对照组。结论:益眼明口服眼对干眼症小鼠模型有一定的治疗作用,能改变干眼症小鼠模型泪腺及角膜部分白细胞介素蛋白表达,从而证明益眼明口服液对干眼症炎症因子有抑制作用。
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