论文部分内容阅读
目的：膀胱癌是我国最常见的泌尿生殖系统肿瘤，发病率居泌尿系统肿瘤的首位，治疗后复发率高达55％-85％，病因至今仍不十分明确。膀胱癌的发生发展是一个十分复杂的过程，随着分子生物学的发展，从基因水平研究膀胱癌的发生、发展变化规律，成为近年来研究的热点，与膀胱癌相关的标记物有癌基因(如：H-ras、erbB2、mdm2、CCND1等)，抑癌基因(如：Rb、P53、P21、等)及DNA错配修复基因等。1979年首次发现P53抗癌基因，最初被认为是癌基因，1989年有人发现P53能抑制细胞恶性转化，之后许多实验结果证实P53是抗癌基因。P53基因位于17号染色体短臂1区4带，P53基因是人类恶性肿瘤研究最为广泛的抑癌基因之一。故迄今为止许多独立的研究结果一致认为，P53蛋白表达是膀胱癌重要的预后因子。增殖细胞核抗原(ProliteratingcellNuclearAntiger，PCNA)是近年来发现的一种酸性核蛋白，是一种相对分子量为3.6×106的酸性核蛋白，是反映细胞增殖分数和所处周期的客观指标，可以判定肿瘤恶性程度及预后[1]。因为膀胱癌的异质性，病理分级临床分期无法准确预测膀胱癌的生物学行为，敏感而特异的预后指标对于指导治疗和取得最佳疗效具有重要意义。运用单个基因来分析它显然也是不够的，本文探讨P53和PCNA在膀胱癌中表达与膀胱癌的复发和预后的关系，以便能更准确的为我们临床的诊断、治疗、判断预后提供可靠的方法。
方法：以经病理证实的102例膀胱移行细胞癌组织蜡块标本为研究对象，采用免疫组织化学方法，进行P53和PCNA检测。男78例，女24例。年龄36～86岁，平均61.24岁。肿瘤大小：最大直径8.5cm，最小者0.4cm。病理组织学分级：Ⅰ级43例，Ⅱ级47例，Ⅲ级12例。临床分期：T1期32例；T2期24例；T3期25例；T4期21例。102例随访结果，随访时间3～5年，复发56例，死亡6例，这6例均为癌复发后死亡。试剂选用美国ZYMED公司的鼠抗人PCNA试剂和鼠抗人P53试剂；美国ZYMED公司的SP试剂盒；北京中山生物技术公司的DAB、抗体稀释液。染色方法采用S-P法，选择以PBS代替一抗作为阴性对照，以已知膀胱癌阳性切片作为阳性对照。统计学分析：采用spssV11.0软件对样本进行分析。P＜0.05为有显著意义。
结果：阳性结果判断，光镜下，P53、PCNA细胞核有棕黄色颗粒为阳性，阳性细胞数＜10％为(-)，10-25％为(+)，25-50％为(++)，＞50％为(+++)。
1P53在Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级膀胱癌组织中阳性表达率逐渐升高，依次为69.77％(30/43)、91.49％(43/47)、100％(12/12)，P53的表达与病理分级(Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级)之间有统计学意义(P＜0.05)。各级间P53的表达有统计学差异(P＜0.05)。
2PCNA在Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级膀胱癌组织中阳性表达率逐渐升高，依次为69.77％(30/43)、82.98％(39/47)、100％(12/12)，PCNA的表达与病理分级(Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级)之间有统计学意义(P＜0.05)。各级间PCNA的表达有统计学差异(P＜0.05)。3P53在T1、T2、T3、T4期膀胱癌组织中表达阳性率逐渐升高，依次为71.88％(23/32)、83.33％(20/24)、88.00％(22/25)、95.24％(20/21)。P53的表达与临床分期之间有统计学意义(P＜0.05)。
4PCNA在T1、T2、T3、T4期膀胱癌组织中表达阳性率逐渐升高，依次为71.88％(23/32)、79.17％(19/24)、80.00％(20/25)、90.48％(19/21)。PCNA的表达与临床分期之间有统计学意义(P＜0.05)。
5P53阳性的复发率为34.12％(29/85)，阴性的复发率为5.88％(1/17)。P53阳性和阴性表达与膀胱癌的复发和预后有统计学意义(P＜0.05)。PCNA阳性的复发率为29.63％(24/81)，阴性的复发率为9.52％(2/21)。P53阳性和阴性表达与膀胱癌的复发和预后有统计学意义(P＜0.05)。
6P53和PCNA在膀胱癌中的表达有统计学意义(P＜0.05)。在膀胱癌中P53和PCNA的表达具有正相关。
结论：P53和PCNA的表达在膀胱癌的发生、发展中起重要作用，与膀胱癌的分期分级相关，与膀胱癌的预后相关，二者在膀胱癌中的表达有相关性，肿瘤的多基因分析比单基因分析更有价值，为估计膀胱癌的复发和预后提供了重要的参考指标。