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目的：用酵母双杂交技术研究与RISC相关的蛋白并确定其功能。
方法：以能表达人类真核翻译起始因子AGO2的pSos质粒作为诱饵，采用CytoTrap酵母双杂交系统，选用人类肺组织的cDNA文库，筛选与诱饵相互作用的蛋白，并在酵母中验证蛋白－蛋白相互作用的特异性。将筛选出来的相互作用蛋白和诱饵蛋白在真核HEK293细胞中共同表达，用免疫共沉淀和Western blot技术进一步验证二者的相互作用。在体内，将表达筛选所得蛋白的质粒转入人胶质瘤细胞系U373中已经构建好的RNA干扰体系中，观察这些蛋白对RNA干扰中RISC活性的影响。
结果：经过CytoTrap酵母双杂交系统的筛选，共得到22个可能的阳性相互作用子。在酵母中验证蛋白-蛋白相互作用的特异性后，得到7种不同的阳性质粒。
用免疫共沉淀和Western blot技术进一步验证二者的相互作用，最后得到4种相互作用的蛋白，分别为人类蛋白酶体26S ATP酶亚基3；人类DNA断裂因子，45kDa，α多肽（DFFA）；人类p53相关细胞蛋白（PACT）；视网膜神经胶质瘤结合蛋白6（RBBP6）异构体2。体内试验证明人类蛋白酶体26S ATP酶亚基3，能够增加RISC的活性。人类DNA断裂因子45kDaα多肽（DFFA），能够抑制RISC的活性。人类p53相关细胞蛋白（PACT）以及视网膜神经胶质瘤结合蛋白6（RBBP6）异构体2，对于RISC的活性无明显影响。