【摘 要】
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在对逆转录病毒致病机理及治疗方案的研究中，逆转录病毒感染和整合过程中所必需的寄主细胞因子是具有深远意义的研究靶目标。逆转录病毒生活周期的早期事件有：与寄主细胞接触并
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在对逆转录病毒致病机理及治疗方案的研究中，逆转录病毒感染和整合过程中所必需的寄主细胞因子是具有深远意义的研究靶目标。逆转录病毒生活周期的早期事件有：与寄主细胞接触并结合，脱壳进入靶细胞，病毒基因组进入细胞核，病毒RNA基因组反转录为DNA，最后病毒DNA整合到寄住细胞基因组内。在这个过程中，许多细胞因子与病毒相互作用并且执行重要功能。培养的小鼠胚胎干细胞易感于逆转录病毒的感染，说明它们提供了病毒感染过程中所需的一切有功能的寄主因子。为了寻找并且分析那些与病毒有相互作用并且对病毒感染和整合起到关键作用的寄主细胞因子，本论文研究创建了一个新的筛选体系，用于筛选并且鉴定因诱导突变而获得抗病毒感染能力的干细胞群体。作为筛选对象，细胞突变库是由具有随机插入性突变的Blm-缺陷型胚胎干细胞组成。筛选体系主要基于两大要素：首先，对干细胞突变文库进行长期反复的病毒感染，所用的病毒是携带正负筛选标记的重组病毒。其次，对感染过后的细胞突变库进行严格的负筛选以达到排除受到感染的细胞的目的。在成功的完成了筛选之后，本论文研究发现了五种独立的具有抗病毒感染能力的细胞群体。用分子生物学方法分析这五种突变细胞群体的基因型，发现它们都属同一基因，即mCat-1，它是已知的莫洛尼氏鼠白血病病毒的受体基因。其中四种基因型是纯合子而另一种是杂合子。这个结果充分证明了这种筛选方法的可靠性和有效性，它提供了一种寻找其他与病毒感染早期事件相关的细胞因子的新途径。同时也说明这种具有随机插入性突变的Blm-缺陷型胚胎干细胞突变文库是一种宝贵的资源，利用它以及其它不同的病毒载体可以广泛地寻找与病毒感染机制相关的细胞因子。
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