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人谷氨酰环化转移酶（GGCT,γ-glutamylcyclotransferase）参与到谷胱甘肽的循环中，可以将L-γ-Glutamyl-L-amino acid降解为L-amino acid和5-Oxoproline。有研究表明，GGCT的mRNA和蛋白在许多肿瘤中表达上调，可能是肿瘤特异表达的标志物。但是，GGCT是否能够作为肿瘤发生发展驱动因素？GGCT在肿瘤发生中具体参与哪些生理生化功能？目前尚未有文献报道，有待研究。 本课题旨在初步探究GGCT对肺癌细胞的生物学行为的影响和其亚细胞定位，获得以下研究成果。 1、分析肿瘤基因组公共数据库，证实GGCT的mRNA在多种人类肿瘤中相对正常组织高表达。进一步发现其CNV(Copy Number Variations)与mRNA显著正相关，GGCT的拷贝数在肿瘤组织中有显著扩增。另外，我们发现GGCT是一个受原癌基因RAS调控的基因。利用Trametinib(MEK inhibitor)处理细胞，将会抑制GGCT的转录。这说明，GGCT并不是随着肿瘤发展而被动变化的基因，而是其变异可能是促进肿瘤的发生发展的重要因素。 2、构建GGCT的病毒表达载体(pOZ-FH-C-Puro)，筛选稳定表达Flag-Ha-GGCT的细胞系，进行生物学行为分析。利用结晶紫染色实验，发现GGCT过表达后促进细胞增殖;利用细胞划痕实验，发现GGCT过表达增强细胞迁移能力;免疫沉淀实验与质谱联用(Immunoprecipitation-Mass Spectrometry，IP-MS)，未找到特异的强互作蛋白。 3、利用免疫荧光染色技术，检测GGCT在不同细胞系的亚细胞定位，以及在不同应激刺激条件下GGCT在细胞内的定位。我们发现，GGCT主要分布在细胞质中。在BFA(BrefeldinA)的刺激下，外源性GGCT由细胞质进入细胞核。 综合上述研究结果，我们发现，GGCT在肿瘤细胞中，GGCT的转录受到RAS通路调控，拷贝数扩增，其CNV与mRNA显著性正相关。过表达GGCT将促进细胞增殖和迁移能力。GGCT主要定位于细胞质中。在受到外界刺激时，定位发生改变，由细胞质转入细胞核。本研究的完成为进一步研究GGCT在肿瘤中如何参与发生过发展过程打下坚实基础。