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目的:评估0.1％他克莫司滴眼液治疗难治性重度干眼疗效。 方法:本研究招募已使用人工泪液合并激素治疗半年或半年以上，但干眼症状及体征未见明显缓解的重度干眼患者26名。所有给予0.1％他克莫司滴眼液合并人工泪液治疗，并于治疗前、治疗后1月、2月及3月观察干眼相关临床指标，包括:干眼症状评分(Ocular Surface Disease Index，OSDI)、泪膜破裂时间(Tear breakup time，TBUT)、泪液分泌试验(Schirmer I)、角膜荧光素钠染色评分(FluoresceinStaining Score，FL)、结膜充血程度分级及睑板腺功能评级。于治疗后1月后采用结膜印迹细胞法检查(Conjunctival impression cytology, CI)观察结膜上皮细胞鳞状化生评级以及结膜杯状细胞数量。应用角膜共聚焦显微镜检查观察角膜上皮细胞及上皮下神经在治疗1月后的变化。 结果:经0.1％他克莫司联合人工泪液治疗后，干眼患者OSDI评分明显下降，治疗前为53.89±15.49分，治疗1月评分为36.39±10.96分(Z=57，p＜0.001)，2月评分为25±9.35分(Z=46，p＜0.001)，3月为24±7.42分(Z=27，p＜0.001)。治疗后，干眼患者泪膜破裂时间显著增加，治疗前为0.55±0.74秒，治疗1月为2.5±1.38秒(Z=34，p＜0.001)，2月为2.89±0.78秒(Z=23，p＜0.001)，3月为3.6±0.55秒(Z=21，p＜0.001)。角膜荧光素钠染色评分明显降低，治疗前为8.22±3.14分，治疗1月为5.17±2.62分(Z=15，p＜0.001)，2月为4.89±1.67分(Z=11，p＜0.001，3月为5.2±1.64分(Z=11，p＜0.001)。结膜充血程度评级明显下降，治疗前为3.06±0.64级，治疗1月为2±0.49级(Z=38，p＜0.001)，2月为1.67±0.5级(Z=27，p＜0.001)，3月为1.8±0.44级(Z=15，p＜0.0001)。LogMar视力、泪河高度、泪液分泌试验及睑板腺功能评级治疗前后各时间点均无显著性差异(p＞0.05)。角膜共聚焦显微镜检查显示:治疗1月后，中央角膜上皮基底层细胞数量从治疗前5798±64个/mm2增加至6247±89个/mm2，差异有统计学意义(Z=34，p＜0.05);朗格罕斯细胞明显减少，治疗前为98±35个/mm2，治疗1月为43±25个/mm2，差异有统计学意义(Z=18，p＜0.05);角膜弯曲度评级下降，治疗前为3.35±0.75级，治疗1月后为1.73±0.6级，差异有统计学意义(Z=31，p＜0.05);角膜神经直径增加，治疗前为3.5±0.57Zm，治疗1月后为4.2±0.69Zm(Z=15，p＜0.01);角膜神经念珠细胞治疗前后无显著性差异(Z=38，p＞0.05)。结膜印迹细胞学检查显示:治疗前后，结膜杯状细胞密度增加，治疗前为97±24个/mm2，治疗1月后为150±32个/mm2(Z=24，p＜0.001);结膜上皮细胞鳞状化生评级治疗1月前后无显著性差异（Z=26,p＞0.05）。 结论:0.1％他克莫司治疗难治性重度干眼有效，可显著改善干眼不适症状，提高泪膜稳定性，修复角膜上皮屏障功能，减轻炎症细胞浸润，减轻角膜神经损伤并提高结膜杯状细胞数量。