河北省PRRSV分子流行病学调查及流行株的分离鉴定

来源 :河北科技师范学院 | 被引量 : 3次 | 上传用户:NickFlanders
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猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的以各日龄猪呼吸困难及母猪繁殖障碍为特征的一种急性传染病。该病自1987年首次发现以来,在短短几年间席卷全球,几乎每个国家和地区都遭受到PRRS的侵袭,给各国养猪业造成了不同程度的损失。为了探明河北省PRRS的流行情况,给河北省PRRS的预防控制提供数据支撑,本研究针对河北省PRRSV开展了初步分子流行病学调查并对流行毒株进行分离鉴定。主要研究内容如下:1.本研究共采集河北省7个地级市208份PRRSV疑似病料。检测结果显示,PRRSV检出率高达50.48%(105/208);其中HP-PRRSV检出率为13.94%(29/208),变异毒株NADC30-like检出率为40.86%(85/208),HP-PRRSV与NADC30-like毒株混合感染检出率为4.33%(9/208)。对部分检测阳性病料毒株nsp2进行扩增并测序,得到19株毒株nsp2基因序列。将这19株毒株的nsp2基因序列比对发现,19株毒株中6株与HP-PRRSV毒株高度同源,13株毒株与NADC30毒株高度同源。本研究结果表明,PRRSV在本省普遍存在,以NADC30-like毒株感染为主,且毒株在不断进化,提示应加强本省PRRSV的预防监测。2.对秦皇岛市某猪场送检的病料进行病毒分离,在猪肺泡巨噬细胞(PAM)上传三代后传至Marc-145细胞,在第4代Marc-145细胞上出现明显的病变,经RT-PCR方法和间接免疫荧光检测均为阳性,确定成功分离到一株PRRSV,将其命名为PRRSV QHD1。3.通过基因组测序,获得了PRRSV QHD1株的全基因组序列。分析表明,PRRSV QHD1株与欧洲型代表毒株Lelystad virus、EuroPRRSV全基因组序列同源性较低,分别为60.3%和60.4%;与北美型NADC30毒株的全基因组同源性最高,为94.2%。通过重组分析表明该毒株为重组毒株,其中有两个区域存在重组,分别在7 913-8 015 nt和12 780-13 158 nt之间,推测该毒株可能为NADC30毒株和疫苗株RespPRRS MLV的重组毒株。PRRSV NADC30-like毒株为我国最新出现的变异毒株,且易发生重组,应给予足够的重视。
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