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目的：利用转基因技术研究激动大鼠心肌细胞(H9c2)M3受体对HIF-1α及其调节基因的影响
方法：采用脂质体介导的质粒转染方法，建立稳定表达M3受体的H9c2细胞系，检验H9c2细胞中M3受体的mRNA和蛋白表达水平；观察在稳定表达M3受体的H9c2细胞和或对照组细胞中，不同剂量carbachol及carbachol作用不同时间后，对VEGF、HO-1 mRNA表达水平的影响；在常氧状态下，用carbachol刺激及carbachol联合YC-1(HIF-1α抑制剂)处理稳定表达M3受体的H9c2细胞系及对照组H9c2细胞系，检测HIF-1α、VEGF、HO-1的mRNA表达水平。
结果：稳定表达M3受体的H9c2细胞系中M3受体mRNA和蛋白表达水平明显高于对照组细胞系；用不同剂量carbachol处理稳定表达M3受体的H9c2细胞系后，VEGF、HO-1的mRNA表达水平随着carbachol浓度的增加而呈逐渐上升趋势，并在100μM浓度下达高峰；用carbachol处理稳定表达M3受体的H9c2细胞系后，VEGF、HO-1的mRNA表达水平在0.5h后呈增高趋势，随后逐渐增高并在2h达高峰，继而进入平台期，12h出现回落；在常氧状态下，carbachol处理稳定表达M3受体的H9c2细胞系2h后，HIF-1α及其下游调控基因VEGF、HO-1的mRNA表达水平明显增高；HIF-1α抑制剂YC-1和carbachol协同处理后，HIF-1α、VEGF、HO-1表达水平的增高明显受到抑制。
结论：carbachol激动M3受体可诱导VEGF、HO-1的mRNA表达水平增高；VEGF、HO-1 mRNA表达水平的增高与carbachol之间可能存在时间和剂量.效应关系；在常氧状态下的H9c2细胞中，carbachol激动M3受体后对HO-1、VEGF的诱导可能是通过HIF-1α介导的。