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子宫内膜异位症(endometriosis, EMs),是一种常见的妇科疾病,育龄期妇女发病率高达10-15%,病灶可侵犯全身任何组织,卵巢子宫内膜异位症是其常见的类型之一。尽管其具体发病机制不明,但一般认为内异症是一种多基因导致的疾病。研究表明长链非编码RNA (long non-coding RNA, lncRNA)的异常表达与多种疾病相关,目前与子宫内膜异位症相关的lncRNA研究还较少。高通量测序技术是研究lncRNA的一种重要方法,国内外目前尚无高通量测序对于子宫内膜异位症的研究,本实验首次采用高通量测序技术对异位内膜(ectopic endometrium, EC)、在位内膜(eutopic endometrium,EU )及正常内膜(normal endometrium, N)组织进行检测,拟为内异症相关的lncRNA的后续研究提供候选基因库,希望有助于进一步揭示lncRNA在内异症发生发展过程中的具体作用机制,及为后期寻找新的靶向治疗药物提供实验基础。第一部分:IncRNA在卵巢子宫内膜异位症中的表达谱分析目的:高通量测序技术筛选卵巢子宫内膜异位症中异位内膜、在位内膜和正常内膜组织间差异表达的lncRNAs,并进行初步的功能研究,探寻内异症可能得发病机制。方法:采集8对人异位内膜、在位内膜组织及5例正常内膜组织进行高通量测序检测,并用生物信息技术对测序得到的海量信息进行分析,筛选三者间差异表达的lncRNAs,对差异lncRNAs进行功能注释。结果:比较异位内膜、在位内膜及正常内膜组之间差异表达lncRNAs,发现异位内膜与在位内膜之间有683个已知lncRNAs和443个新发现的lncRNAs异常表达;在位内膜与正常内膜之间有5个已知lncRNAs和56个新发现的lncRNAs异常表达;异位内膜与正常内膜之间有603个已知lncRNAs和408个新发现的lncRNAs异常表达。对其进行生物信息学分析发现,异常表达的lncRNAs参与多种内异症的分子功能、细胞组分和生物过程中。结论:本研究首次采用了高通量测序技术对正常内膜、在位内膜及异位内膜组织进行检测,发现三者间有大量异常表达的lncRNAs,这些lncRNAs可能在卵巢子宫内膜异位症的发生发展中发挥着重要的作用。第二部分:IncRNAGAPLINC、CTD-2207P18.1 和 RP11-1100L3.8 在卵巢子宫内膜异位症中的表达分析目的:验证 lncRNAGAPLINC、CTD-2207P18.1 和 RP11-1100L3.8 在异位内膜、在位内膜组织及正常内膜组织中的差异表达,并探寻其可能作用途径。方法:提取20对配对的人异位内膜、在位内膜组织及5例正常内膜组织的总RNA,利用实时定量聚合酶链锁反应(quantitative real time PCR,qRT-PCR)方法对3个差异表达的lncRNAs进行检测,2-△△Ct的方法计算不同组织的实时定量数据,组间差异采用t检验,P<0.05认为差异有统计学意义。并对这3个异常表达的lncRNAs进行生物信息学分析。结果:lncRNAGAPLINC和CTD-2207P18.1异位内膜中表达水平明显高于在位内膜,;ncRNARP11-1100L3.8在位内膜中表达水平高于正常内膜,三者参与到内异症的多个GO条目的富集及KEGG通路。结论:qRT-PCR结果分析与高通量测序一致。异位内膜、在位内膜中;ncRNA GAPLINC、CTD-2207P18.1、RP11-1100L3.8存在差异表达,这三者可能参与卵巢子宫内膜异位症的的发生发展。