miR-145对宫颈癌Hela细胞的增殖、凋亡及其对紫杉醇药物敏感性的研究

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目的:检测转染miR-145对宫颈癌Hela细胞的增殖及凋亡的影响,进一步探讨转染miR-145的Hela细胞对紫杉醇药物敏感性的影响,以期为临床宫颈癌的防治提供新的肿瘤标志物及新的治疗靶点。方法:常规体外培养宫颈癌Hela细胞,采用DAPI染色、MTT等方法研究miR-145对宫颈癌Hela细胞增殖、凋亡以及耐药能力的影响,采用SPSS19.0统计分析软件进行分析对照组和各个实验组之间有无显著性差异,以P=0.05作为检验标准。结果:1、FAM标记的miR-145及阴性序列(NC)转染Hela细胞,转染率为75%。2、MTT比色法发现转染miR-145mimics在体外对宫颈癌Hela细胞的生长有抑制作用,有时间依赖性,各组之间比较有统计学意义(P<0.05)。3、DAPI染色测定Hela细胞凋亡后,miR-145mimics组细胞的凋亡率与Blank组、mock组及NC阴性对照组有明显差异(P<0.05);NC阴性对照组、Blank组、Mock组间比较无明显差异(P>0.05)。说明miR-145的过表达对Hela细胞的凋亡能力有促进作用。4、MTT比色法发现紫杉醇在20ug/ml、50ug/ml、100ug/ml浓度范围内在体外对宫颈癌Hela细胞的生长的抑制作用逐渐增强,各组之间比较差异有统计学意义(P<0.05)。5、转染miR-145mimics组与Blank组、Mock组、及NC阴性对照组比较OD490值明显下降(P<0.05),而Blank组、Mock组、NC组之间比较均无统计学意义(P>0.05)。和Blank组相比在接种后0h、24h、48h和72h,miR-145-5p mimics组的活性分别为92.3%、65.1%、62.2%、56.0%,说明miR-145-5p的过表达能增加Hela细胞对化疗药物的敏感性。结论:miR-145能够抑制宫颈癌Hela细胞增殖,促进其凋亡,能够提高Hela细胞对于紫杉醇的敏感性,外源性miR-145或miR-145的类似物有望成为宫颈癌治疗的新药物,其临床应用有待于进一步的研究。
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