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本研究分为三部分:
第一部分:Meis1在人月经周期子宫内膜及蜕膜中的表达
目的:探讨Meis1在人月经周期子宫内膜及蜕膜中的表达。
方法:通过免疫组织化学进行组织学定位,通过western blot在蛋白水平进行定量,检测Meis1在人月经周期子宫内膜及蜕膜中的表达。
结果:1.免疫组化结果显示,Meis1表达于子宫内膜基质和腺上皮细胞的细胞核中。2. Western blot结果显示,Meis1在增生晚期表达较弱,分泌早期表达增加,分泌中期表达显著增强(P<0.05),在早孕蜕膜组织中表达最强(P<0.05)。
结论:Meis1在人月经周期子宫内膜及蜕膜中的周期性表达,提示Meis1可能在子宫内膜容受性的建立及基质蜕膜化过程中发挥重要作用。
第二部分:Meis1在人子宫内膜细胞中的表达及调控
目的:探讨Meis1在人子宫内膜细胞中的表达及其受雌、孕激素调控的规律。
方法:通过免疫细胞化学和western blot的方法检测雌、孕激素对体外培养的在子宫内膜基质细胞(ESC)及Ishikawa细胞中Meis1的表达及调控。
结果:1.免疫细胞化学结果显示,Meis1在ESC和Ishikawa细胞均有表达,且均表达于细胞核中;2.Western blot结果显示:在ESC中,E2、P4和 E2+P4三组中Meis1平均蛋白表达水平均高于对照组(P<0.05)。Meis1在E2、P4和 E2+P4组之间的表达水平亦具有统计学差异(P<0.05),表达强度E2+P4组>P4组>E2组;在Ishikawa细胞中,E2、P4和 E2+P4使Meis1表达增强,表达强度P4组>E2+P4组>E2组,但与对照组比较差异无显著性(P>0.05),E2、P4和 E2+P4各组间差异亦无显著性(P>0.05)。
结论:转录因子Meis1在ESC和Ishikawa细胞中受到雌、孕激素的调控,可能在子宫内膜容受性分子网络的构建中发挥着重要的作用。
第三部分:Meis1在子宫内膜异位症不孕患者子宫内膜中的表达研究
目的:探讨Meis1在子宫内膜异位症(Ems)不孕患者子宫内膜中的表达及其与Ems患者不孕和发病的相关性。
方法:采用免疫组织化学进行组织学定位并进行半定量分析,检测Ems不孕患者异位和在位内膜中Meis1的表达水平。
结果:Meis1在异位内膜和在位内膜中仅有弱表达,而在正常同期内膜中呈较明显的阳性表达。Meis1在异位内膜中的表达与正常同期内膜的光度值进行比较,有显著性差异(P<0.001);比较Meis1在分泌中期在位内膜与正常内膜中的表达,差异亦有显著性(P<0.001)。
结论:Meis1在Ems患者分泌中期在位内膜中低表达,可能是影响子宫内膜容受性的建立,从而影响胚胎着床导致不孕的重要因素之一。同时,Meis1在异位内膜中的低表达说明异位内膜可能对体内雌、孕激素正常调控具有抵抗性,一定程度上具备了独立增殖的能力,提示Meis1可能参与了Ems的发生与发展。