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研究表明机体内氧化还原水平失衡导致的氧化应激是众多疾病的病理生理基础,天然产物中的一些抗氧化活性成分能够清除自由基,使机体内的氧化还原水平恢复动态平衡,从而降低氧化应激对机体的伤害。覆盆子,这一被世界粮农组织(FAO)推荐为第三代黄金水果,已被证实具有较强的抗氧化生物活性。因此本研究旨在探讨覆盆子提取物及其主要花青素对HepG2细胞氧化应激的保护作用。具体研究如下:(1)覆盆子提取物由闪式提取器提取,利用单因素试验及响应面分析法对提取工艺参数进行优化;实验结果显示树莓中提取物提取最佳工艺参数为:乙醇体积分数48%、电压150 V、提取时间57 s,得到覆盆子多酚提取量为(52.244±0.662)mg/g干果。(2)利用标准曲线法、傅里叶变换红外光谱法及高效液相色谱法分析其主要组分及结构;实验结果表明覆盆子提取物中TPC,TFC和TAC分别为10.286±0.396 mg当量没食子酸、15.833±2.89mg当量芦丁和2.467±0.035 mg当量矢车菊素-3-葡萄糖苷,结合傅里叶转变红外光谱及高效液相色谱分析,RE主要成分为酚酸、黄酮及黄酮苷类的多酚化合物,并且其主要组分为矢车菊素-3-葡萄糖苷,含量达到RE的33.59%。(3)通过体外抗氧化试验,对覆盆子提取物及其只要花青素的体外抗氧化活性;实验结果显示覆盆子提取物和矢车菊素-3-葡萄糖苷均表现出良好的体外抗氧化活性,并且在对DPPH自由基清除能力相当的情况下,覆盆子提取物体现出比矢车菊素-3-葡萄糖苷较强中总抗氧化能力,这可能是由于RE内多种物质之间存在协同作用,起到增强抗氧化作用。(4)利用过氧化氢(H2O2)诱导HepG2细胞建立氧化应激模型,利用此模型研究覆盆子及其主要花青素对氧化应激的保护作用机制;实验结果显示4μM H2O2可用来构造HepG2细胞的氧化损伤模型,当HepG2细胞受到H2O2的氧化损伤时,细胞活力(存活率)、GSH含量、CAT活力发生显著变化,覆盆子提取物及矢车菊素-3-葡糖糖苷能显著提高损伤HepG2细胞活力;降低损伤细胞内ROS水平,增高细胞中CAT活力和GSH含量,Western Blotting结果显示覆盆子提取物及矢车菊素-3-葡萄糖苷参与Keap1/Nrf2信号通路中,调节该信号通路下游靶蛋白HO-1、NQO1和γ-GCS的表达,进而保护HepG2细胞因氧化应激造成的损伤。结论:覆盆子提取物及其主要花青素矢车菊素-3-葡萄糖苷具有较强的抗氧化活性,能够参与Keap1/Nrf2信号通路,保护HepG2细胞免受氧化应激损伤。