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腺相关病毒(adeno-associatedvirus，AAV)作为成熟的基因治疗载体之一，已应用于许多疾病的临床治疗。以增加AAV对宿主细胞的感染靶向性和转导效率为目的的病毒重组改良不断在进行尝试并获得突破。其中对AAV衣壳蛋白的改造和修饰是近年来比较常用的策略。最近，将AAV进行固相化处理的研究开始出现，使AAV的感染能够被限制在可控的区域。同时，AAV在组织工程中与可吸收材料的复合应用也逐渐受到关注。本研究通过在AAV的衣壳蛋白VP2基因N端插入串联的FLAG标签序列，获得具有FLAG表位的新型重组腺相关病毒。利用这一特征，我们通过抗体交联技术，将标签的AAV固化到PLGA等组织工程支架材料，构建成独特的基因治疗投递系统。结果表明FLAG抗体介导的AAV固相化体系可以有效地增加细胞转导的区域准确性和外源基因表达效率。本研究不仅提供了对AAV衣壳蛋白进行突变改造并获得新型抗原特征的成功案例，同时通过与组织工程材料结合的应用性尝试，展示出腺相关病毒的固相化处理技术对AAV在临床应用中新的前景。
结论：
1．通过四质粒共转染方法对能够有效制备带有FLAG标签的新型重组腺相关病毒。
2．FLAG重组腺相关病毒，能被特异性抗体捕获，在增加感染靶向性的同时不会被中和而降低病毒的转导效率。
3．生物可吸收性组织工程支架经特异性的抗体交联修饰后能够富集和固化FLAG标签的新型AAV病毒，并且有效提高投递的准确性和细胞的转导效率。