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[目的]:1、本研究旨在探讨KiSS-1基因转染不同恶性度骨肉瘤细胞MG-63、U2-OS后对其体外增殖、迁移、侵袭能力的影响。2、观察转染前后骨肉瘤MG-63、U2-OS细胞基质金属蛋白酶及基质金属蛋白酶抑制剂的表达变化,初步探讨KiSS-1抑制骨肉瘤细胞转移的可能机制。[方法]:1、脂质体法介导KiSS-1基因转染骨肉瘤MG-63、U-2OS细胞。2、RT-PCR法检测转染前后KiSS-1基因转录水平的变化;Western blot法检测转染前后KiSS-1蛋白的表达。3、CCK8法、划痕实验、Transwell小室法检测转染前后细胞增殖、迁移、侵袭能力的变化。4、Realtime PCR方法测定细胞转染前后各组肿瘤细胞产生的基质金属蛋白酶及基质金属蛋白酶抑制剂在mRNA水平的变化。5、明胶酶谱分析法检测转染前后细胞基质金属蛋白酶原和活性基质金属蛋白酶的变化。6、Western blot法检测转染前后基质金属蛋白酶抑制剂的变化。[结果]:1、脂质体法介导KiSS-1基因转染骨肉瘤MG-63、U-2OS细胞,经G418抗性筛选获得稳定表达KiSS-1基因的骨肉瘤MG-63、U-2OS细胞株。2、转染KiSS-1基因后的骨肉瘤MG-63、U-2OS细胞株KiSS-1基因的转录及蛋白表达水平有显著增高。3、转染KiSS-1基因后的骨肉瘤MG-63、U-2OS细胞较其亲代细胞的增殖、迁移、侵袭能力降低。4、转染KiSS-1基因后的骨肉瘤MG-63细胞基质金属蛋白酶MMP2的表达及活性降低;转染KiSS-1基因后的骨肉瘤U-2OS细胞基质金属蛋白酶MMP9的表达降低。5、转染KiSS-1基因后的骨肉瘤MG-63、U-2OS细胞基质金属蛋白酶抑制剂TIMP1明显上调,TIMP2没有显著差别。[结论]:1、利用脂质体将KiSS-1基因转染到骨肉瘤MG-63、U-2OS细胞是可行、有效、稳定的。2、PSNAV2.0-KiSS-1能够介导目的基因在骨肉瘤细胞内稳定高效地表达。3、转染KiSS-1基因的骨肉瘤MG-63、U-2OS细胞的增殖、迁移、侵袭能力降低。4、KiSS-1通过影响基质金属蛋白酶MMP2和MMP9及其抑制剂TIMP1的表达从而使细胞的侵袭能力下降。5、KiSS-1基因可能参了骨肉瘤细胞的侵袭和转移的调控,有望成为骨肉瘤基因治疗的一个有应用前景的基因。