【摘 要】
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研究目的本课题探讨乳酸在不同环境中对胰腺癌细胞的生物学功能的影响,并进一步研究乳酸-MCT1轴在其中的作用及机制。旨在为胰腺癌的综合治疗提供新的方向和思路。研究方法利用DMEM培养基和无糖培养基分别在体外模拟常糖微环境和低糖微环境,然后在两种条件下分别添加5m M、10m M、20m M的乳酸。利用MTT细胞增殖实验,平板克隆形成实验来检测胰腺癌细胞的增殖能力。利用划痕愈合实验,transwell
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研究目的本课题探讨乳酸在不同环境中对胰腺癌细胞的生物学功能的影响,并进一步研究乳酸-MCT1轴在其中的作用及机制。旨在为胰腺癌的综合治疗提供新的方向和思路。研究方法利用DMEM培养基和无糖培养基分别在体外模拟常糖微环境和低糖微环境,然后在两种条件下分别添加5m M、10m M、20m M的乳酸。利用MTT细胞增殖实验,平板克隆形成实验来检测胰腺癌细胞的增殖能力。利用划痕愈合实验,transwell侵袭实验检测胰腺癌细胞的迁移侵袭能力。接着,利用RNAi技术敲低胰腺癌细胞MCT1的表达,通过q RT-PCR和Western Blot实验检测敲低效率。其次,在常糖微环境+乳酸和低糖微环境+乳酸的条件下检测敲低MCT1后胰腺癌细胞的增殖,迁移侵袭能力的生物学改变。以探究在低糖微环境下乳酸引起的胰腺癌细胞的生物学效应是否依赖于MCT1。最后通过生物信息学方法分析MCT1在胰腺癌中表达情况及与患者生存预后的关系。研究结果在我们的研究中发现一定浓度（10m M）的乳酸可以促进胰腺癌细胞在低糖微环境下的增殖,迁移侵袭能力。但在常糖微环境中,额外添加不同的乳酸浓度并未明显改变胰腺癌细胞的生物学效应。其次,利用RNAi技术敲低胰腺癌细胞系MCT1的表达后,乳酸在低糖微环境下促进胰腺癌细胞的增殖,迁移侵袭能力明显下降。在常糖微环境下,敲低MCT1不影响胰腺癌细胞的增殖,迁移侵袭能力。最后,通过生物信息学分析发现MCT1在胰腺癌中高表达,且其高表达与胰腺癌患者的不良预后高度相关。而且肿瘤分期高的胰腺癌患者的MCT1的表达同样升高,提示着MCT1在胰腺癌中的促癌作用。研究结论在常糖微环境微下,乳酸对胰腺癌细胞的增殖,迁移侵袭能力无明显影响。在低糖微环境情况下,10m M的乳酸可以维持胰腺癌细胞的生存,促进其迁移侵袭能力。20m M的乳酸时,其效应达到最大,且乳酸发挥作用是MCT1依赖性的。提示着乳酸-MCT1轴在胰腺癌中发挥着重要作用,但关于乳酸是如何发挥作用的机制还需进一步的研究。
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