基于拉曼光谱的三阴性乳腺癌新辅助化疗前后变化分析

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目的拉曼光谱是研究振动化学粒子的技术,通过分析化学粒子的信息,对样品中的化学物质进行定性和定量分析。本研究的目的是通过参照正常乳腺组织,应用拉曼光谱技术对新辅助化疗前后三阴性乳腺癌组织成分变化进行分析,以期进一步评估该技术是否可以作为评估新辅助化疗效果的方法之一和指导新辅助化疗方案策略及预测三阴性乳腺癌患者的愈后。方法从2015年7月—2019年7月就诊于我院的乳腺癌患者中,筛选出符合条件的患者,其中病理结果均为乳腺非特殊型浸润性导管癌,免疫组织化学标记结果ER、PR、Her-2均为阴性的三阴性乳腺癌(TNBC)的患者,收集患者的相关资料。所有患者均根据美国国立综合癌症网络(NCCN)指南,并结合患者的基本情况,采用TEC(T:多西他赛,E:表柔比星,C:环磷酰胺,根据患者的体表面积给予相应的剂量)化疗方案,于术前给予新辅助化疗6个周期。临床上依据RECIST指南,经超声经线测量探查新辅助化疗前后肿瘤的最大两个径线评估乳腺癌新辅助化疗效果,病理采用Miller-Payne(MP)分级系统评估乳腺癌新辅助化疗效果。本研究所有样本组织均使用福尔马林固定石蜡包埋组织(Formalin fixation and paraffin embedding,FFPE),这些组织均来自于新辅助化疗前的活检组织,以及新辅助化疗后手术切除的组织标本。所有组织样本均从临床病理科获得,并从每个样本中分别连续采集2张2微米厚的切片(一张用于组织学检查,一张用于拉曼光谱检测),经脱蜡,标准化程序处理后,一张切片经苏木精-伊红(HE)染色,由两位临床病理科医师进行常规组织病理学分析,找到病灶最明显区域,并在另一张未染色组织切片相同的位置进行标记。经超声经线评估和病理评估(MP分级系统),将患者分为部分缓解组和稳定组,两组患者所有组织样本切片分为三阴性乳腺癌新辅助化疗前数据,三阴性乳腺癌新辅助化疗后数据,正常乳腺组织数据,共6组,分组依次进行拉曼光谱检测,并将获得的所有拉曼数据分别导入origin8.5软件中绘图。分类将所有的拉曼光谱图进行归一化、平滑处理后,对比分析所得到的拉曼光谱图。结果从所得到的拉曼光谱显示,部分缓解组患者:新辅助化疗后三阴性乳腺癌组织拉曼光谱中出现了明显的类胡萝卜素(1158cm-1、1518cm-1)波峰;新辅助化疗后三阴性乳腺癌组织与正常乳腺组织拉曼光谱具有一定的相似性;新辅助化疗后三阴性乳腺癌组织饱和脂肪酸(2888cm-1、2926cm-1)浓度和磷脂浓度(1264cm-1)降低。稳定组患者:新辅助化疗前后三阴性乳腺癌组织拉曼光谱无明显变化,饱和脂肪酸和磷脂波峰强度有所减少,并未出现明显的类胡萝卜素波峰。对于新辅助化疗前三阴性乳腺癌组织,化疗反应稳定的患者相对于部分缓解的患者,主要区别在于磷脂和饱和脂肪酸的浓度较高。结论1.三阴性乳腺癌新辅助化疗反应部分缓解的患者存在拉曼光谱的改变;2.新辅助化疗反应稳定的患者拉曼光谱变化不明显,拉曼光谱可以作为一种三阴性乳腺癌化疗评估手段进一步观察与研究;3.通过对新辅助化疗前三阴性乳腺癌组织的检测,拉曼光谱可以预测三阴性乳腺癌患者愈后需进一步研究;4.拉曼光谱技术可以指导三阴性乳腺癌患者新辅助化疗方案需进一步观察。
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