利用基因枪法将芪合成酶基因转入小麦的研究

来源 :中国科学院遗传学研究所 中国科学院遗传与发育生物学研究所 | 被引量 : 0次 | 上传用户:HYP0214
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植物抗毒素(Phytoalexin)在植物抵抗真菌和细菌感染时起重要的作用.芪类(Stilbene)物质即是基中一种.利用基因枪法将来源于葡萄中的芪合成酶(Stilbene Synthase)基因转入普通春小麦品种京红5号的幼胚盾片,获得了转基因植株,并获得了PCR及Southern Blot证据.从轰击的620块胚中共获得3个转化植株(T<,0>代),转化率为0.48%.为了转化频率的提高,在实验中对影响基因轮转化小麦的一些因子进行了优化:①轰击前幼胚经过4-5天的养与接种当天轰击以及预培养14天相比,其GUS基因的瞬时表达量明显增多,为后两者的2倍以上;②轰击前4-6小时至轰击后16-18小时用0.5-0.74mol/l的甘露醇对幼胚进行高渗处理,有利于转化频率的提高,GUS基因瞬时表达量是对照的4-5倍;③轰击时所用金粉与DNA的配比量对轮化频率有很大的影响.每枪用250μg金粉及0.5μg外源DNA时GUS基因的瞬时表达量是对照的2.5-15倍.
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