论文部分内容阅读
真菌毒素是由真菌产生的次级代谢有毒产物，其中 AFBi、AFB2、AFGi, AFG2& OTA不仅毒性大而且污染广泛。中药材从种植、采收到贮藏极易受到真菌毒素的侵害，不经控制而被使用后会造成更加严重的危害。因此，有必要建立准确、灵敏、可靠、简便的检测方法监控中药中真菌毒素的污染水平，以保证中药用药安全并为制定相应的限量标准提供依据。 本课题通过查阅文献和预实验，针对鸦胆子和生姜等应用广泛且污染频率较高的中药，建立了黄曲霉毒素和赭曲霉毒素A的检测方法，主要研究内容如下： 1、建立了免疫亲和柱净化-髙效液相色谱-在线柱后光化学衍生-荧光法测定中药鸦胆子中AFB1、AFB2、AFG1、AFG2及质谱确证 样品以甲醇-水溶液提取，经免疫亲和柱净化-高效液相色谱-在线柱后光化学衍生-荧光检测器（IAC-HPLC-PCD-FLD)检测，并对阳性样品进行HPLC-MS/MS确证。AFB1、AFB2、AFG1、AFG2分别在0.50?50.00、0.15?15.00、0.50?50.00、0.15?15.00 n g/m L范围内线性关系良好，检测限分别为0.08、0.015、0.06、0.02 fig/kg,平均加样回收率为74.3％?100.8%。阳性样品AFB1和AFs的污染水平分别为0.26?22.89和0.31?27.52阳/kg。本实验首次建立了中药鸦胆子中黄曲霉毒素检测的方法，并对阳性样品进行了质谱确证。与中国药典中方法相比，该方法操作简单、准确性高、可靠性强，适用于对鸦胆子中黄曲霉毒素污染的监控。 2、建立了免疫亲和柱净化-超高效液相色谱-荧光法快速同时检测中药生姜中AFBi、AFB2、AFG? AFG2和 OTA及质谱确证 样品以甲醇-水溶液提取，经免疫亲和柱净化后，用超高效液相色谱-荧光检测器（IAC-UPLC-FLD)进行快速检测，并以HPLC-MS/MS对阳性样品进行确证。AFB1、AFB2、AFG1、AFG2和OTA平均加样回收率为75.2%?99.7%，检测限分别为0.04、0.04、0.10、0.07和0.25阳/kg。阳性样品AFB1和OTA的最大污染量分别为6.50和20.66呢/kg，同时对阳性样品进行了质谱确证。该方法快速、准确、简便，可用于生姜中AFs和OTA的快速检测。 3、建立了分子印迹固相萃取柱净化-超高效液相色谱-荧光法快速检测生姜中OTA的方法及质谱确证 样品采用乙腈-水溶液提取，经 MIP-SPE柱净化后，以 UPLC-FLD检测。OTA在1.00?100.00 n g/m L范围线性关系良好，回收率为87.6%?94.5%，检测限和定量限分别为0.09和0.30 pg/kg。经过再生处理后，分子印迹固相萃取柱可被重复使用41次。在优化的UPLC条件下，样品分析时间仅需3.3min。该方法简便快速、经济可靠，适用于生姜中OTA污染的快速检测。