论文部分内容阅读
目的: 研究As2O3 和Aspirin 联合应用对高转移性小鼠前胃癌浸润、淋巴管生成及淋巴道转移的抑制作用；探讨As2O3 和Aspirin 联合应用在肿瘤浸润，淋巴管生成和转移中的作用机制，以及两药联合在肿瘤治疗中的可行性。阐明As2O3 和Aspirin 联合应用是通过降低COX-2 及其下游蛋白MMP-2、VEGF-C 的表达，抑制肿瘤浸润和转移。
方法: 复苏小鼠前胃鳞癌（MFC）细胞，接种于数只近交系615 小鼠右侧腋窝皮下，待肿瘤直径长至1～1.5cm 时，断颈处死小鼠并在无菌条件下完整剥离肿瘤，无血清的1640 培养基中冲洗、剪碎，过200 目滤网制成单细胞悬液，分别接种于两只小鼠右侧腋窝皮下，如此体内传代至第四代后，同法无菌制备肿瘤细胞悬液，于45 只615 系小鼠右侧后肢足垫内侧皮下接种。成瘤后将小鼠随机分为5组：生理盐水组、Aspirin 组、As2O3 组、As2O3 和Aspirin 联合组、As2O3 和Aspirin减半联合组。连续用药14 天，末次用药后24 小时处死小鼠。测量各组小鼠体重、瘤重，计算肿瘤抑制率；肿瘤组织及心、肝、肾、胃等脏器常规石蜡包埋、切片，镜下观察其组织结构变化；采用免疫组织化学PV 法检测瘤组织内COX-2、LYVE-1、MMP-2 的表达情况，并计数微淋巴管密度（LMVD）；Western blotting检测COX-2、LYVE-1、MMP-2、VEGF-C 的表达。
结果:
1. 与生理盐水组相比，各治疗组615 小鼠移植瘤生长均受抑，以联合组明显（P<0.05），生理盐水组、Aspirin 组、As2O3 组、减半联合组及联合组其肿瘤平均瘤重（g）分别为1.69±0.13、1.43±0.11、0.95±0.09、0.92±0.13 和0.67±0.11；Aspirin 组抑瘤率为15.4％，As2O3 组抑瘤率为43.8％，减半联合组为45.6％，联合组为60.4％；淋巴结内瘤组织学转移抑制率As2O3 组为22.4％，减半联合组和联合组分别为28.6％，50.0％。
2. 免疫组织化学染色结果显示，各给药组均不同程度下调COX-2蛋白的表达，与生理盐水组相比差异有统计学意义（P<0.05），其中联合治疗组与其它治疗组相比也有统计学意义（P<0.05）；联合治疗组与减半联合组、Aspirin组、As2O3组及生理盐水组相比，LYVE-1蛋白的表达及LMVD计数均显著减少（P<0.05）。
3. Western blotting结果显示各给药组均不同程度下调COX-2、MMP-2、VEGF-C和LYVE-1的表达，与生理盐水组相比具有显著性（P<0.05），其中联合组与其它治疗组相比也有统计学意义（P<0.05）。
结论:
1. As2O3与Aspirin单独或联合应用均可抑制MFC移植瘤的生长和侵袭；两药联合作用较强。
2. As2O3与Aspirin可抑制MFC移植瘤的淋巴管生成和淋巴结转移，联合用药组作用明显。
3. As2O3与Aspirin可能通过抑制COX-2的活性，进而减少MMP-2、VEGF-C的表达，最终对615小鼠MFC移植瘤生长侵袭，淋巴管生成和淋巴结转移产生抑制作用。