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目的与背景随着人们生活水平提高,饮食结构的改变,结直肠癌(colorectal cancer, CRC)已经成为最常见的消化道恶性肿瘤之一,由于它与肥胖关系密切,所以隶属于肥胖相关性肿瘤。在我国,结直肠癌的发病与高蛋白、低纤维饮食,及少运动等生活习惯相关,以至于其发病率位列癌症排行榜的第3位,死亡率位列癌症排行榜的第4位,总体呈现明显上升趋势；在北京上海等发达城市,结直肠癌的发病率尤为突出[1]。学者们认为肿瘤的发生是一个漫长的过程,其过程中需要多基因变异和多步骤致癌,所以要从正常细胞发展到癌组织必须要经历一般增生,从一般增生过度到不典型增生,最后发展为癌。因此在这期间我们可以通过早期阻断结直肠癌的发生和发展,来达到治疗的作用。目前手术切除、放疗、化疗、分子靶向治疗、免疫治疗是临床上常用的治疗结直肠癌的手段,但大多数患者就医时疾病已经发展到局部晚期或出现多发转移,因此早发现、早诊断、早治疗成为治疗恶性肿瘤的关键。肥胖是结直肠癌的高危因素,而脂肪组织又是衡量肥胖的重要指标。脂肪组织在受到机体刺激后能够分泌多种细胞因子,而脂联素就是其中之一,在人体内其分布及表达范围较广,与冠心病、2型糖尿病、慢性血管性疾病、肿瘤等多种疾病密切相关[2-4],它可通过刺激下游的信号转导通路调节体内糖脂代谢、改善胰岛素抵抗从而达到抗肿瘤的作用[5-8]。而脂联素并不是单独发挥作用,其必须通过配体与受体的特异性结合而发挥相应的功能,所以其受体分为AdipoRl和AdipoR2(R1和R2)两种结构,本次实验旨在研究脂联素及其受体与肿瘤之间的联系,特别指定为结直肠癌,因为其与肥胖的关系较为密切,所以收集结直肠癌组织标本、结直肠腺瘤组织标本以及正常结直肠组织标本,将其分为3组分别检测各组中脂联素受体的表达情况,通过分析结直肠癌癌前病变中脂联素受体的表达,探讨R1和R2在结直肠癌发展中的作用,为癌症的早期诊断、治疗提供理论依据及实验基础。材料与方法1资料收集郑州大学第一附属医院2012-04至2012-09期间胃肠外科及肛肠外科结直肠癌患者行手术切除后经病理科证实的结直肠癌标本51例,结直肠腺瘤42例,结直肠癌旁组织35例。结直肠癌组中直肠癌24例,结肠癌27例,其中男30例,女21例,平均年龄37.8岁±10.9岁(25岁～83岁)；组织学类型：乳头状腺癌13例、管状腺癌15例、印戒细胞癌10例、黏液腺癌13例；分化程度：低分化26例、中分化13例、高分化10例；淋巴结转移15例,无淋巴结转移36例；TNM分期：Ⅰ期和Ⅱ期33例、Ⅲ期和Ⅳ期18例；结直肠腺瘤组中绒毛状腺瘤15例、管状腺瘤18例、管状绒毛腺瘤9例；结直肠癌旁组织组作为正常对照,平均年龄39.2岁±8.6岁(25岁～58岁)。三组分别取下一长约1cm左右组织标本,用10%中性福尔马林液固定,石蜡包埋后,连续切片厚度规定为5μm。2主要试剂：兔抗人脂联素受体1和脂联素受体2多克隆抗体购自上海生物工程有限公司,SP试剂盒和DAB显色试剂盒及免疫组化所需原材料均购自北京中杉金桥生物技术有限公司。3方法：免疫组化染色,切片脱蜡至水,抗原高压修复,山羊血清封闭,滴加抗体1,R1和R2抗体分别按1：300和1：250稀释,4℃过夜时间大约16h,滴加2抗,DAB显色剂显色,树胶封片,以PBS液代替一抗制作出的片子称为阴性对照。4统计处理：全部统计数据采用SPSS17.0软件包进行数据检验。3组结直肠组织中R1和R2的表达应用x2检验进行比较。结直肠癌组织与临床病理特征之间的关系采用列联系数进行检验,检验水准α=0.05。结果13组结直肠组织中R1的表达脂联素受体在所有结直肠癌、结直肠腺瘤以及正常直肠腺体上皮细胞中均有表达,主要定位于细胞质,分别呈淡黄色、棕黄色、棕褐色颗粒状。结直肠癌组的染色最深,腺瘤组次之,正常对照组最浅(图1A-C)。23组结直肠组织中R2的表达结直肠癌组的染色最深,腺瘤组次之,正常对照组最浅(如图1D-F)。3R1和R2表达与结直肠癌临床病理参数的关系：脂联素受体的表达与结直肠癌的分化程度、有无淋巴结转移及TNM分期相关,与年龄、性别、组织学类型、肿瘤大小无关。同时R1和R2的表达在三种组织中关联性无统计学意义。结论R1和R2在3种结直肠组织中均有不同程度的表达,但R1和R2表现出相同的特征,即在人结直肠癌组织中表达高于腺瘤组织,腺瘤组织中表达高于癌旁组织。并且R1和R2与肿瘤的恶性程度相关,是预测肿瘤的一项重要指标。