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乙型肝炎病毒(HBV)是一种非细胞病变的部分双链DNA病毒,能够引起急性和慢性肝脏疾病。HBV感染一直是威胁人类健康的重要公共卫生问题,全世界每年约有一百万人死于HBV感染引起的肝硬化、肝衰竭和肝癌。全球范围内约有75%的肝细胞肝癌(hepatocelluar carcinomas, HCC)是由HBV感染发展而来的。1970年Lacent首次报导了HBV与HCC的关系,之后不断有学者研究证实了这一结论。虽然HBV的致癌性已经明确,而且研究人员也发现了有多种细胞因子可能参与HBV相关的致病和致癌作用,但HBV究竟通过何种机制致癌的目前还没有定论。CD82是一种肿瘤抑制基因,是4次跨膜超家族(transmembrane 4 superfamily, TM4SF)成员之一。近年来的研究逐渐证实CD82基因表达下降或缺失与人类多种肿瘤有关。本研究就围绕这个问题对其机制进行深入的探讨。首先我们检测了肝癌组织(携带HBV病毒)和正常肝脏组织标本及肝癌细胞系HepG2和HepG2.215细胞中CD82的表达,发现肝癌组织和HepG2.215细胞中CD82的表达明显低于正常肝脏组织和HepG2细胞。接下来我们在mRNA和蛋白水平证明了HBV能抑制CD82的表达。在HBV编码的七个蛋白中,我们发现HBx能够明显抑制CD82的表达,提示HBV可能主要是通过HBx 来抑制CD82的表达。为了进一步研究HBx抑制CD82的机制,我们从转录调控入手。通过启动子的截短实验、EMSA实验和CHIP实验表明,启动子上的EGR1位点在CD82表达中起主要作用。同时我们发现HBx能与转录因子EGR1相互作用,这可能会抑制EGR1与其位点结合的功能从而抑制了CD82的表达。其次我们从表观遗传学入手,通过DNA甲基化测序和MSP实验我们发现：HBV可能是通过增强CD82启动子区甲基化水平来抑制其转录。总之,本研究将表观遗传学和基因转录调控相结合,发现了HBV抑制CD82的表达可能是由HBx与EGR1相互作用以及启动子区域的甲基化增强所导致的。这为我们深入了解乙型肝炎病毒调控基因的分子机制及肝癌的临床治疗提供了新的思路和方法。