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前言 阻塞性泪道疾病是一类常见眼病，溢泪、溢脓等症状给患者身心带来痛苦，且作为潜在感染灶，易造成角膜溃疡、外伤后感染及危胁内眼手术，甚至造成失明。传统的手术疗法损伤大、操作复杂、出血多、术后遗留颜面疤痕，影响美容。保守疗法只起暂时的机械扩张作用，易造成再次狭窄或阻塞，复发率高，而不易被患者接受。 泪道阻塞的治疗难点在于其结构纤细迂曲狭长，容易因异物、炎症刺激导致局部粘膜上皮损伤，肉芽组织增生而形成狭窄或阻塞。如何抑制治疗后泪道的再狭窄或阻塞，维持足够大的管腔面积是该领域研究的新课题。目前国内外对泪道阻塞治疗的的研究主要集中于各种治疗手段临床疗效的比较，缺乏科学的理论依据。基础研究还不够深入。国内外对血管及胆道系统的再狭窄的实验研究已经深入到分子基因水平，如伴随再狭窄过程中增殖细胞核抗原(PCNA)的高表达，丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)编码的与细胞凋亡有关的细胞外信息调节激酶(ERK1／ERK2)的激活，细胞外基质(ECM)在基质金属蛋白酶(MMP_s)／抑制剂(TIMP_s)调控下的动态平衡等，并比较不同治疗手段治疗前后相关指标的差异。而对各种阻塞泪道疾病的实验动物模型病理过程，狭窄或阻塞的机理及分子生物学实验研究，泪道阻塞性的药物治疗未见系统而深入报道。自上世纪90年代以来，随着激光技术开发的日新月异及其在临床的广泛应用，国内逐渐开展激光泪道成形术治疗阻塞性泪道疾病，不仅对鼻泪管阻塞、慢性泪囊炎有较好的疗效，而且对不适合手术的泪小管、泪总管阻塞有独特之处。 目前应用于临床的激光主要有Nd：YAG激光。Nd：YAG激光，波长1064nm，功率3-6W，为不可见光，采用半导体激光作指示光。该激光治疗泪道阻塞的机制是利用激光的热效应，主要是碳化及汽化效应去除增生的纤维结缔组织(主要成份是成纤维细胞)，具有峰值功率高，平均功率低，穿透力强的，组织热效应低的特点，加上最新的数码控制输出能量和频率任意组合的优点，对泪道周围组织无明显热损伤，恢复泪道管状结构，成功率高。但该技术仍然存在一定的局限性和复发率，最主要的是术后纤维结缔组织增生形成瘫痕导致再狭窄而限制了其在临床上的广泛应用。 丝裂霉素(MMC)是一种抗代谢药物，是头状链霉菌产生的一乙撑亚胺类抗生素混合物中的一种成分(C15HI。N4o，)，具有烷化作用，与DNA分子的双螺旋形成交联，破坏DNA的结构和功能，抑制增殖期DNA的复制，对增殖各期细胞均有杀伤作用，同时也作用于静止期细胞。体外组织培养证明，MMC对成纤维细胞有明显的抑制作用，因而可用来阻止手术区的纤维结缔组织再生，现已被国内外广泛应用于抑制青光眼滤过性手术后滤过泡的纤维细胞增生和瘫痕形成，保持滤过道的通畅。近几年国内外有学者尝试应用不同浓度MMC治疗泪道阻塞疾病，取得了较满意的效果。但是对泪道阻塞及再狭窄的基础与理论研究还不够系统而深人。 泪道阻塞及再狭窄是多种细胞因子和生长因子介导的局部重建和再塑及成纤维细胞迁移、增殖、凋亡及细胞外基质分泌和堆积的过程。细胞外基质在这个过程中所起的作用日益为人们所重视，阻塞及再狭窄的主要成分即是细胞外基质和增生的成纤维细胞，而且细胞外基质还参与调节成纤维细胞的增殖，从而影响泪道重构。细胞外基质受基质金属蛋白酶(M皿Ps)及基质金属蛋白酶抑制剂(TIMPs)的调控，在二者的动态平衡中维持泪道的正常功能。细胞内信息传递和转录的调控与再狭窄发生发展密切相关。丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)是细胞内多种促细胞增殖信息传递的交会点和共同通路，是细胞表型变化和增殖的关键酶，与细胞周期Gl一S一G2一M的调控密切相关。MAPK可编码两种细胞外信息调节醉刊4ERKI和P42ERKZ，他们激活后可以激活多种早期反应的核内癌基因，引起细胞增殖。 本实验研究通过制作家兔泪道阻塞模型，并对该模型施行Nd:YAG激光及MMC治疗，比较不同治疗手段作用的机制及差异，以便更好地为临床提供有效治疗措施。实验方法 一、动物模型的建立 1.实验动物及分组:选择日本纯种雄性大耳白兔26只，体重2一3公斤，月龄6一8个月(中国医科大学实验动物部提供)。家兔适应性饲养1周，随机抽签分组:(1)泪道阻塞组24只。(2)空白对照组2只。 2.泪道阻塞模型的建立:对第一组家兔施全身麻醉(速眠新注射液0.ZIDFkg腹腔注射)，将带导丝的球囊导管(直径2.0~)探人到双眼泪小管处并标记长度，压力表充盈球囊6一8个大气压至回拉有阻力时，磨擦泪道粘膜，标记磨擦长度，撤压并间歇l分钟，再重复操作3次，将球囊导管取出。将泪道探针探人到鼻泪管，注人血管硬化剂(凝胶海绵+复方泛影葡胺注射液)，抽出针头。家兔饲养至出现溢泪/溢脓症状。 二、泪道阻塞模型施行不同治疗手段 对泪道阻塞模型行Nd:YAG激光及丝裂霉素C(MMC)治疗:将泪道阻塞模型随机分成三个亚组:(l)单纯激光泪道成形术治疗组(Y);(2)激光泪道成形术+MMC治疗组(Y+M)。(3)阻塞未治疗组，每组各8只16眼，分别予以不同治疗手段，?