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金华火腿作为地方传统特色食品,如何有效控制和评判其品质特性,一直以来都是相关的科研人员、企业乃至地方政府所关注的焦点。目前火腿的品质鉴定一般集中在外表样式、气味及风味等方面,而对优质火腿品质评价和控制尚缺乏规范有效的方法。蛋白质作为火腿中最主要的成分,它的变化对火腿品质的影响很大,因此从蛋白质的角度研究火腿的品质特性具有重要的意义。双向凝胶电泳技术是目前研究蛋白质的较核心的技术,利用双向电泳技术筛选出与火腿品质相关的特征蛋白的变化,为研究火腿的品质评价打下基础。本研究通过对火腿样品制备和双向电泳条件等相关技术参数进行比较和优化,建立了火腿双向电泳的技术方法；并以“雪纺蒋”、“冠美”、“宗泽”、“金字”四种品牌金华火腿为研究对象,对不同品牌的金华火腿进行了差异蛋白质组学的初步研究。并对“雪纺蒋”、“冠美”两种品牌金华火腿货架期内进行了差异蛋白质组学研究,主要实验结果如下：1、在本实验已经建立的生鲜猪肉双向电泳条件下,通过对火腿肌肉组织样品制备图谱的比较,发现采用凝胶层析脱盐柱-冷冻干燥-裂解法制备火腿肌肉样品能有效去除样品中的盐分,并达到了提高蛋白的抽提率的效果,具有较高的分辨率和良好的重复性。2、通过对胶条pH、蛋白上样量、等电聚焦参数以及染色方法等条件的优化,建立了火腿肌肉蛋白质双向电泳的方法。结果表明,采用pH5-8、蛋白质上样300 ug、渐进式升压的方式能获得较好的等电聚焦效果,减少横条纹；改进后的银染能检测到更多的低丰度蛋白,适于凝胶分析。3、应用建立的火腿肌肉组织双向电泳方法对四种不同品牌的金华火腿蛋白样品进行差异蛋白质组学分析。SDS-PAGE凝胶电泳结果表明,差异蛋白主要分布在18.4KD～35KD和45KD～116KD之间。通过双向电泳分离,“雪纺蒋”、“冠美”、“宗泽”、“金字”四种品牌金华火腿肌肉组织的双向电泳凝胶的平均蛋白点数分别为1238±7、1126±6、1067±9、1035±10,经PDQuest8.0软件对比筛选分析得到“雪纺蒋”和“冠美”、“雪纺蒋”和“宗泽”、“雪纺蒋”和“金字”、“冠美”和“宗泽”、“冠美”和“金字”、“宗泽”和“金字”显著差异的蛋白点分别有11、12、11、8、6、6个。4、应用建立的火腿肌肉组织双向电泳方法对“雪纺蒋”、“冠美”牌金华火腿不同货架期内蛋白样品进行差异蛋白质组学分析。不同货架期的差异蛋白主要分布在18.4 KD～35 KD和45 KD～116 KD之间。对“雪纺蒋”牌金华火腿相邻货架期的图谱进行统计分析,从中分别筛选出10、8、5、12、10个具有显著差异的蛋白点。对“冠美”牌金华火腿相邻货架期的图谱进行统计分析,从中分别筛选出11、8、7、8、4个具有显著差异的蛋白点。本实验初步找到的“雪纺蒋”“冠美”牌金华火腿货架期内每相邻两个时间点之间的差异蛋白质点,可以分为三类：(1)在货架期内表达量基本不变的蛋白质。此类蛋白质对火腿货架期内品质变化的影响很小,几乎可以忽略不计。(2)随着货架期时间的延长表达量下降或者不再表达的蛋白质。这类蛋白质可能参与了蛋白质的分解,形成了更小分子量的蛋白质及其他的小分子物质。(3)随着货架期时间的延长表达量提高的蛋白质。这类蛋白质可能是大分子蛋白质分解产生的,分解产生的蛋白质与之前原有的蛋白质分子相加和,使得这部分蛋白质量有所增加。