对三株益生菌的生物拮抗性和发酵工艺条件的研究

来源 :大连医科大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:basilmhb
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微生态制剂越来越受到人们的关心和重视,相对于单一种类的微生态制剂,复合型微生态制剂以其更好的疗效和作用更加受到关注。本实验就是要研究一种三联益生菌制剂来替代传统的抗生素药物治疗腹泻。传统治疗腹泻的方法有很多弊端,如四环素,氟哌酸对婴幼儿骨骼发育有影响;氯霉素口服可导致再生障碍性贫血等。微生态学研究证明:人体正常菌群,对人类肠道不但具有生物屏障作用,而且对肠道致病菌有较好的抑制作用。为了寻找一种有效的肠道菌群调整剂,我们选用人体正常菌群之一的嗜酸乳杆菌为主要菌种,制成复方嗜酸乳杆菌制剂以满足临床需要。目的:1通过对已有菌种的鉴定和检验,确定三株益生菌对肠道致病菌(大肠埃希菌、痢疾杆菌、伤寒杆菌、金黄色葡萄球菌)有抑制作用。2通过拮抗实验证明三联益生菌制剂对致病菌的拮抗作用。3通过对发酵条件的摸索,为将来的中试和生产提供依据。方法:1通过形态学、生物化学等方法对各个菌种进行鉴定。2耐药性评价实验:采用药敏纸片琼脂扩散法检测实验菌株对十种抗生素的敏感程度。3菌种的生长曲线测定:对三种益生菌和四种肠道致病菌采取连续培养,每隔一定时间取样涂平板,记取活菌数的方式来测定其生长曲线。4拮抗实验:单联拮抗实验,将三种益生菌和四种肠道致病菌进行两两配对,混合后同时培养,间隔一定时间取样涂平板,记取活菌数来观察每种菌的生长情况。三联拮抗实验,将三种益生菌混合后,再分别与四种肠道致病菌混合培养,间隔一定时间取样涂平板,记取活菌数来观察每种菌的生长情况。5发酵工艺的研究:运用正交实验法,采用三因素(发酵时间、pH值、发酵温度)三水平来设计实验。结果:通过各种实验的鉴定,对已有菌种的特性有个初步的了解和掌握。耐药性评价实验可以看出所选用的菌种并没有抗抗生素的特性,尤其是肠球菌,对万古霉素没有抗性,可以正常使用。拮抗实验证明其对肠道致病菌有拮抗作用。结论:通过各项实验说明,所选出的三种益生菌可以达到预期的对致病菌的抑制作用,可以作为接下来的中试生产的菌种以及以后的一系列实验。同时还摸索出初步的发酵条件,可作为今后生产的实验依据。
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