小鼠早期胚胎发育过程中iNOS和nNOSmRNA的表达

来源 :湖南农业大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:zhangliu2009
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一氧化氮(nitric oxide,NO)是一种具有自由基性质的生物活性分子,能溶于水并具有脂溶性,化学性质非常活跃,作为一种小分子气体信号分子,NO在机体防御、神经信号传导、血管扩张等生理过程中发挥着重要的作用.生物体内的一氧化氮由一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)催化L-精氨酸(L-arginine,L-Aig)脱胍基产生L-胍氨酸(L-citrulline,L-Cit)而成,哺乳动物有三种不同构型的NOS,即神经型一氧化氮合酶(neuronal nitric oxide synthase,nNOS)、内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)、诱导型一氧化氮合酶(inflammatory or macrophage nitric oxide synthase,iNOS).NOS是一氧化氮生成过成中的限速酶,因此某一组织中NOS的量能线性反应出该组织中NO的量.近年来有许多研究表明NO在体内外早期胚胎发育中具有重要的调节作用.动物早期胚胎的发育是个体发育的重要阶段,其发育过程受体内许多因素(包括NO)的调节和影响.人们已从多个方面对早期胚胎发育过程作了大量的研究,然而对NO在早期胚胎中可能产生的生理调节作用了解较少.为了探讨NO对小鼠附植前胚胎发育的影响,采用反转录聚合酶链式反应(reversetranscription-polymerase RT-PCR)方法检测了附植前各发育时期胚胎中nNOS和iNOS的mRNA的表达情况,用目的基因与内参照管家基因β-actin的引物共同扩增cDNA后,进行PCR产物的琼脂糖凝胶电泳,可见692bp和554bp处有明显的两条带.结果表明:小鼠囊胚中观察到有iNOS mRNA的表达,小鼠1-细胞期、2-细胞期、4-细胞期和8-细胞期胚胎以及桑椹胚中没有观察到iNOS mRNA的表达;而1-细胞期、2-细胞期胚胎中nNOS mRNA表达明显,且1-细胞期胚胎比2-细胞期胚胎表达量稍高.这表明NO参与了小鼠附植前胚胎的发育,并可能与附植前胚胎的信号传递及早期分化有关.
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