罗非鱼加工副产物中硫酸软骨素的分离纯化技术及其部分性质的研究

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硫酸软骨素(Chondroitin sulfate, CS),是一种具有生物活性的酸性粘多糖,已经广泛用于治疗神经痛、冠心病、角膜炎、关节炎等疾病,而且近几年随着研究的深入,硫酸软骨素已逐步推广到食品与化妆品领域。本文以罗非鱼下脚料(鱼头、鱼鳍、鱼尾)为原料,分别采用超声波、微波、超声-微波协同萃取等三种方法提取硫酸软骨素,对其提取液进行超滤纯化处理后再利用乙醇沉淀法得到高纯度的硫酸软骨素样品,最后利用凝胶色谱、紫外光谱、红外光谱、高效液相色谱及核磁共振等仪器对样品的分子量、纯度及结构等进行分析和鉴定,并且研究了样品的抗氧化能力。此外,还初步探讨了不同部位所含硫酸软骨素的含量及其结构的差异。主要的研究结果如下:1.针对三种提取方法,分别采用单因素试验和响应面法分析优化硫酸软骨素的提取工艺,结果表明:影响CS提取率的主要因素为功率、料液比、处理时间及碱浓度,由方差分析可知,其中功率和料液比对提取率的影响最为显著。2.三种方法中,超声-微波协同萃取法提取硫酸软骨素的提取率最高,达到了2.513%,分别是微波法的1.54倍,超声波辅助提取法的4倍。3.提取液脱色研究表明:最优脱色工艺是70-C条件下,调节pH3.5,加入活性炭3%,脱色20min,其中pH值与粉末活性炭用量对脱色效果影响最为明显;而超滤纯化处理的适宜条件为:在操作压力为2bar,料液温度为30℃的条件下,超滤时间控制在40min为宜。4.经检测,纯化后的CS样品基本不含有核酸和蛋白质等杂质,纯度能达到98.78%;由红外光谱和凝胶色谱分析可知,本实验所提取出的硫酸软骨素分子量为129582,主要是硫酸软骨素-C型。5.比较了硫酸软骨素纯化前后的抗氧化能力变化,结果表明:硫酸软骨素粗品和纯品对羟自由基、DPPH·自由基以及超氧阴离子自由基均有一定的清除作用,并随着CS样液浓度的增大,清除作用加强。6.三个不同部位中,鱼鳍和鱼尾中CS的提取率较为接近,而鱼头中CS的提取率则显著高于鱼鳍或鱼尾,分别是它们的1.69倍和1.78倍。且经红外光谱初步分析可知,罗非鱼的鱼头、鱼鳍及鱼尾中的多糖结构基本一致,均为含有硫酸基团的硫酸软骨素多糖。
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