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远缘杂交是种质遗传改良的重要途径,利用该方法将播娘蒿(Descurainia sophia)的优良品质向甘蓝型油菜渗透具有重要意义。本实验是建立在前人工作的基础上完成的,所以主要是对甘蓝型油菜与播娘蒿远缘杂交杂种后代F3和F4代植株进行形态学观察、细胞学观察、SSR分子标记分析和品质化学筛选等研究,以期筛选优异材料,结果如下:
1、形态学观察和农艺性状表现:在远缘杂交杂种后代植株中观察到许多形态变异类型,如叶缘缺刻较多,心叶黄化,雄性不育、花冠大小、花瓣形态变异等类型。成熟期观察到株型、株高、全株角果数、千粒重和单株产量等数量性状变异类型。F3代共81个家系,每个家系随机选取5株观察各时期性状。统计结果显示,F3代植株苗期叶缘呈锯齿状的居多,占总数的85.05%;同时观察到心叶黄化的植株。开花期花冠中等大小及以上的植株占85.53%。成熟期植株株型有多种变异类型;株高平均值为129.7±19.65cm;全株角果数平均值为389.5±100.32个;千粒重平均值为3.01±0.87g;单株产量平均值为20.54±10.99g。
F4代考察了257个家系,每个家系随机选取3株观察各时期性状。杂种F4代植株苗期、开花期性状同样出现了许多形态变异类型。F3代出现的心叶黄化植株在F4代仍表现为黄化类型。成熟期考种,杂种后代F4株高平均值为140.9±22.69cm;全株角果数平均值为366.1±164.42个;千粒重平均值为3.36±0.50g;单株产量平均值为18.60±6.60g。可以看出,F4代植株性状表现出与F3代植株性状一致的特点。
2、染色体数目变异和染色体行为:F3、F4代杂种植株染色体平均数分别为35.6±3.67条、35.3±4.74条。在杂种后代植株减数分裂过程中观察到单价体,环状二价体,棒状二价体,染色体落后,染色体桥和染色体分裂不均衡等异常现象。
3、SSR分子标记分析:在42对播娘蒿SSR引物中筛选得到22对引物,其可以在亲本播娘蒿中扩增出特异性条带,然后对杂种后代进行筛选,只有9对引物在杂种后代中能够扩增到播娘蒿特异性条带,此法可以研究杂种后代中播娘蒿遗传物质的渗入情况。实验结果表明,杂种后代F3、F4检测到播娘蒿遗传物质的植株频率较低分别为8.21%、4.01%,呈逐代减少的趋势。
4、获得优质遗传材料:对双低甘蓝型油菜与播娘蒿远缘杂种自交后代进行选择和品质鉴定,F3代群体鉴定了430份材料,得到13份黄籽材料,其中有4份黄籽双低高油油菜新材料,其品质符合含油量大于45%、硫苷低于30μmol/g、芥酸小于0.5%的双低高油标准,这4份材料在F4代仍然表现黄籽双低高油性状。在F4代群体1025份材料中,又得到24份黄籽材料,其中有8份是黄籽双低高油甘蓝型油菜新材料。因此,通过甘蓝型油菜与播娘蒿远缘杂种的选择,可为黄籽双低高油甘蓝型油菜育种提供潜在育种材料。
通过对杂种后代进行形态学观察、细胞学观察、分子标记分析、品质化学分析和筛选,可获得具有播娘蒿基因渗入的油菜杂种后代,并为油菜育种提供新材料。