PRRSV病毒分离及其ORF5基因序列分析

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猪繁殖与呼吸综合征(Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome,PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒引起猪的一种新型传染病。该病自1987年首次在美国发现以来,迅速遍及世界各地,它所引发的“流产风暴”使养猪业蒙受了灾难性的经济损失。本研究采集PRRS疑似病料142份,在猪肺泡巨嗜细胞上进行病毒分离,成功分离到15株毒株。根据GeneBank中PRRSV美洲毒株(VR 2332)基因序列设计合成了针对ORF5基因(含部分ORF4和ORF6基因)的引物,利用RT-PCR方法从15株美洲型分离毒株细胞培养物中扩增出大小约760bp片段,克隆入pMD18- T载体后,送往宝生物工程技术有限公司测序。应用DNAStar软件对所测基因的序列与国内外已发表毒株的序列进行同源性比较,构建基因进化树,并对其推导氨基酸序列及GP5蛋白的一些特性与国内外已发表毒株进行比较。分析结果表明15株分离毒株与PRRS美洲型毒株亲缘关系较近,推导氨基酸序列同源性为88.9%-99.8%,并且15株分离株位于遗传进化树的同一分支上,推测它们源于同一个毒株。
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