【摘 要】
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用西番莲(Passiflora edulis)病株中分离出的黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV),经过纯化后提取病毒RNA作模板,根据已报道的CMV株系外壳蛋白基因序列保守区设计出一对
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用西番莲(Passiflora edulis)病株中分离出的黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV),经过纯化后提取病毒RNA作模板,根据已报道的CMV株系外壳蛋白基因序列保守区设计出一对引物,经过RT-PCR扩增后,获得CMV外壳蛋白cDNA序列.用EcoR V酶切pBS质粒,然后进行两端加T反应,构建成pBS-T载体.把CMV外壳蛋白cDNA克隆到pBS-T上,并进行核苷酸全序列分析,结果表明:CMV西番莲分离株的CP基因全长657bp,与CMV-C的外壳蛋白基因、CMV-B(从香蕉中分离)和CMV-Q的外壳蛋白基因的序列相比较,核苷酸同源率分别为93.30﹪、93.46﹪和77.32﹪.把CMV外壳蛋白基因插入pBI121,构建成植物表达载体pBIC.用DNA直接导入法将pBIC导入到土壤根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)中,用于转基因研究.
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