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本课题以铜藻为原料,利用有机溶剂萃取法分离出岩藻黄质,主要研究了岩藻黄质提取工艺的优化、岩藻黄质的抗氧化性和抗炎活性。主要研究成果如下:1.岩藻黄质提取、分离纯化研究通过单因素试验,探讨了传统的有机溶剂提取法和超声波辅助萃取法中各因素对铜藻中岩藻黄质提取率的影响,再采用正交试验优化提取方案:常规有机溶剂浸提法中当工艺条件为溶剂70%乙醇、温度70℃、液料比68m L/g、时间127min时,提取率可达最高为0.72mg/g;超声辅助萃取的最优工艺参数:70℃的初始温度、50ml/g的液料比、50min的处理时间,提取率为0.70mg/g(干重)。提取得到的岩藻黄质乙醇溶液通过石油醚萃取进行分离纯化。2.岩藻黄质体外抗氧化活性研究(1)测定岩藻黄质对自由基的清除能力和还原能力,研究结果表明,岩藻黄质具有较强的抗氧化能力,当浓度为0.05mg/ml时,DPPH清除率可以达到93.6%,超氧阴离子清除率为77.5%,羟基自由基清除率达到84.8%,还原力2.2,并呈剂量依赖性。(2)以双氧水处理RAW264.7巨噬细胞建立氧化应激细胞模型,对岩藻黄质保护细胞氧化损伤的作用机理进行初步研究。采用MTT法测定细胞存活率,结果表明,与双氧水单独作用比较,20μmol/L岩藻黄质预处理24h能明显缓解过氧化氢对细胞增殖的抑制作用;利用试剂盒检测细胞内抗氧化酶、细胞因子水平,结果显示,岩藻黄质可以显著提高细胞内SOD和GSH-Px的水平,并显著降低LDH和NO的释放量。总之,岩藻黄质是一种强效的抗氧化剂。3.岩藻黄质对RAW264.7细胞免疫调节作用研究通过建立四个模型,分别研究岩藻黄质单独作用对细胞因子的影响、在细胞发生炎症反应时对细胞因子调节能力以及岩藻黄质对细胞炎症反应的保护作用和修复作用。结果表明,岩藻黄质单独作用于细胞时,与空白组比较,岩藻黄质可显著提高细胞因子IL-6、IL-10和TNF-α水平,但又小于脂多糖(LPS)组水平,且差异显著(P<0.05);在炎症发生条件下,与LPS炎症组比较,岩藻黄质可显著降低TNF-α、IL-6和IL-10的释放量,缓解细胞炎症反应;岩藻黄质主要通过抑制促炎因子TNF-α、IL-6的释放和提高抑炎因子IL-10的水平起到保护及修复炎症损伤细胞的作用。综上可知,铜藻含有一定的岩藻黄质,铜藻中岩藻黄质在体外具有一定的抗氧化能力及抗炎活性,为以后的进一步研究提供一定的基础。