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背景和目的:临床上器官功能衰竭终末期需要进行器官移植的患者，实际上大部分由于受到多次感染、妊娠、多次输血、透析或者已行组织/器官移植，使得体内存在不同水平的抗原特异性或者非特异性记忆性T细胞(Tm)，对二次移植可产生超急性排斥反应。皮肤预致敏小鼠可以模拟人体内的这种Tm存在的状态，尝试在皮肤预致敏小鼠的二次心脏移植模型中，使用FTY720和共刺激分子单克隆抗体的抑制方案，尽量减少Tm对二次移植物的浸润，从而达到延长移植物生存期的目的，并探讨此中可能的机制。
方法:首先构建从BALB/C小鼠到C57BL/6小鼠的初次背部皮肤移植，4周后，受体C57BL/6小鼠排斥掉移植的皮肤，以此皮肤预致敏小鼠为受体，BALB/C小鼠为供体，进行颈部异位心脏移植术，即是二次移植。根据用药治疗情况分成四组，对照组、FTY720组、共刺激分子单克隆抗体组和联合用药组。给药方案为:FTY720的剂量为2mg·kg-1·day-1，心脏移植术前3天给药，直至术后第14天;共刺激分子单克隆抗体(Costimulator molecule monoclonal antibody,anti-mouse-LFA-1 and anti-mouse-CD40L mAb)用量分别为0.1 mg/次anti-mouse-LFA-1 mAb和0.25mg/次anti-mouse-CD40L mAb，术后第0，2，4，6天各给药一次。观察心脏移植物生存期，运用免疫细胞学、分子学和蛋白学检测TEM、Treg细胞，IL-2、IFN-γ和IL-10、TGF-β等细胞因子，以及移植物中细胞因子mRNA表达的情况和移植物病理切片等研究其可能机制。
结果:
1、FTY720组和共刺激分子单克隆抗体治疗组的平均生存期(MST)分别为4.6天和4.7天，比较对照组MST为3.4天，具有差异性;在联合用药组，MST达到了18天，比较对照组和共刺激分子单克隆抗体组差异性显著。
2、在受体鼠外周血，治疗组的CD4+和CD8+T细胞均明显降低;同时FTY720能使外周血中的CD4+和CD8+效应性Tm(TEM)(CD44high CD62Llow)比例下降，联合组比较共刺激分子单抗组，TEM比例下降也均具有显著统计学差异。FTY720使得脾脏中的CD4+TEM、CD8+TEM比例比较对照组没有统计学差异;联合组CD4+TEM的变化较为显著; FTY720组和联合组的CD4+FOXP3+Treg比例比较对照组有明显的升高，联合组比较单克隆抗体组升高亦具有统计学差异。外周淋巴结的TEM变化与在脾脏中相似;比较对照组，Treg在联合组的比例有明显升高。
3、MLR结果显示，FTY720可以明显抑制T淋巴细胞增殖，联合组更明显，CFSE荧光染色测定T细胞增殖实验的结果与此类似;MLR上清的细胞因子含量测定显示FTY720组IL-2，INF-γ水平有不同程度下降，联合组更明显; TGF-β在联合用药组变化趋势与IL-2相反。
4、FTY720可以明显减少CD8+TEM对心脏移植物的浸润;心脏移植物病理ISHLT评分也显示了FTY720和联合用药组比较对照组存在明显差异;联合用药组比较单用抗体组，ISHLT评分差异也具有显著性;治疗组心脏移植物的IL-2、IFN-γ mRNA的表达有不同程度下降，此差异在联合组最为明显;而IL-10、FOXP3的趋势则与IL-2等相反。
5、通过体重记录和相关器官组织的病理切片评分，评估FTY720和抗体对受体小鼠的短期不良反应，发现两者的安全性较好，病理评分不认为有肝肾肺和胃肠道的急性损害作用。
结论:
①FTY720促进归巢，致使外周血CD4+和CD8+T细胞减少，并且大幅度减少CD4+和CD8+TEM亚群的比值，减少TEM对移植物的浸润;
②FTY720单独运用或者联合共刺激分子单克隆抗体可以诱导Treg的增殖、分化，增加IL-10和TGF-β的mRNA表达，促进其分泌的相应细胞因子水甲升高;
③FTY720可以明显抑制TEM的增殖，抑制TEM分泌IL-2、IFN-γ等细胞因子，联合共刺激分子单克隆抗体可以协同加强此抑制功能;
④FTY720和共刺激分子单克隆抗体的短期不良反应较小。