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恶性肿瘤的浸润转移是多种因素参与和调节的复杂过程,其中涉及肿瘤细胞的侵袭力、粘附力、与间质的相互作用等。KISS-1是近年发现的肿瘤转移抑制基因,在正常组织和非转移性肿瘤细胞株中高表达,而在伴有转移的肿瘤组织中表达缺失。大量研究表明,KISS-1可通过诱导肿瘤细胞粘附、降低其移行能力、抑制基质金属蛋白酶对细胞外基质(extracellular matrix ECM)的水解等,进而实现对肿瘤浸润转移的抑制作用。基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)是一类锌离子依赖性蛋白酶家族,在体内主要降解细胞外基质,包括间质胶原酶、间质溶素、明胶酶等,MMP-9是其中重要的一员,被激活之后可形成IV型胶原酶,降解、破坏靠近肿瘤表面的胶原和明胶,导致肿瘤细胞沿着破损的基底膜向周围组织浸润、转移。基质金属蛋白酶抑制剂(tissue inhibitor of matrix metalloproteinases,TIMPs)是MMPs的特异性抑制剂,在所有的TIMPs中,TIMP-1作用最强,与MMP-9共同作用使ECM破坏及修复维持动态平衡,对抑制肿瘤的浸润转移有重要作用。胃癌发病率和死亡率很高,在中国,胃癌占消化道肿瘤的首位,每年约16万人死于胃癌。而浸润、转移是导致胃癌患者死亡的主要原因,因此探讨胃癌的浸润、转移机制已成为目前研究的热点之一。有关KISS-1、MMP-9及TIMP-1在胃癌组织中的表达及意义的研究,迄今国内外尚未见文献报道。为进一步阐明胃癌的浸润、转移机制,寻找抑制胃癌浸润、转移的有效方法,本研究采用免疫组化SP法,分别观察了45例胃癌组织、23例癌旁非典型增生组织及21例正常黏膜组织中KISS-1、MMP-9及TIMP-1蛋白的表达情况,探讨联合检测上述3指标在胃癌浸润、转移过程中的意义,为有效地防治胃癌的浸润、转移提供理论依据。方法1.采用免疫组化SP法分别对45例胃癌组织、23例癌旁非典型增生组织及21例正常黏膜组织中KISS-1、MMP-9及TIMP-1蛋白的表达进行检测。45例胃癌标本中,按有无淋巴结转移分为:转移组22例和无转移组23例;按浸润深度分为:浅肌层组14例、深肌层组15例及外膜组16例。2.统计学处理:所有数据均经SPSS12.0软件进行统计分析。阳性率之间的比较采用χ~2检验(chi-square);两变量之间的关系分析采用相关分析。显著性水准α=0.05。结果1.正常胃黏膜、癌旁非典型增生和胃癌组织中KISS-1蛋白的阳性表达率分别为90.48%(19/21)、60.87%(14/23)和35.56%(16/45);癌组织KISS-1蛋白阳性表达率与相应的癌旁非典型增生组织及正常胃黏膜组织两两相比,差异均有统计学意义(P＜0.05)。2.正常胃黏膜、癌旁非典型增生和胃癌组织中MMP-9蛋白阳性表达率分别为9.52%(2/21)、34.78%(8/23)和60.00%(27/45);癌组织MMP-9蛋白阳性表达率与相应的癌旁非典型增生组织及正常胃黏膜组织两两相比,差异均有统计学意义(P＜0.05)。3.正常胃黏膜、癌旁非典型增生和胃癌组织中TIMP-1蛋白阳性表达率分别为95.24%(20/21)、65.22%(15/23)和40.00%(18/45);癌组织TIMP-1蛋白阳性表达率与相应的癌旁非典型增生组织及正常胃黏膜组织相比,差异均有统计学意义(P＜0.05)。4.22例伴有淋巴结转移的胃癌组织中,KISS-1蛋白阳性表达率为18.18%(4/22),无淋巴结转移的23例胃癌组织中,KISS-1蛋白阳性表达率为52.17%(12/23),两组间相比,差异有统计学意义(P＜0.05)。5.22例伴有淋巴结转移的胃癌组织中,MMP-9蛋白阳性表达率为77.27%(17/22),无淋巴结转移的23例胃癌组织中,MMP-9蛋白阳性表达率为43.48%(10/23),两组间相比,差异有统计学意义(P＜0.05)。6.22例伴有淋巴结转移的胃癌组织中,TIMP-1蛋白阳性表达率为22.73%(5/22),而无淋巴结转移的23例胃癌组织中,TIMP-1蛋白阳性表达率为65.00%(13/23),两组间间相比,差异有统计学意义(P＜0.05)。7.侵及浅肌层、深肌层和外膜的胃癌组织中,KISS-1蛋白阳性率分别为57.14%(8/14)、46.67%(7/15)和6.25%(1/16);侵及外膜的胃癌组织中KISS-1蛋白阳性率明显低于前两者,差异有统计学意义(P＜0.05):而侵及深肌层的胃癌组织中KISS-1蛋白阳性表达率与浅肌层组相比差异无统计学意义(P＞0.05)。8.侵及浅肌层、深肌层和外膜的胃癌组织中,MMP-9蛋白阳性率分别为28.57%(4/14)、66.67%(10/15)和81.25%(13/16);侵及外膜的胃癌组织MMP-9蛋白阳性率明显高于前两者,差异有统计学意义(P＜0.05);而侵及深肌层的胃癌组织中MMP-9蛋白阳性表达率与外膜组相比差异无统计学意义(P＞0.05)。9.侵及浅肌层、深肌层和外膜的胃癌组织中,TIMP-1蛋白阳性率分别为64.29%(9/14)、46.67%(7/15)和12.50%(2/16);侵及外膜的胃癌组织中TIMP-1蛋白阳性率明显低于前两者,差异有统计学意义(P＜0.05);而侵及浅肌层的胃癌组织中TIMP-1蛋白阳性表达率与侵及深肌层组相比差异无统计学意义(P＞0.05)。10.KISS-1、MMP-9及TIMP-1蛋白在胃癌中的表达相关性经统计学分析显示:KISS-1蛋白的表达与MMP-9呈负相关,而与TIMP-1呈正相关;MMP-9蛋白的表达与TIMP-1呈负相关(P＜0.01)。结论1.正常胃黏膜、癌旁非典型增生及胃癌组织中,KISS-1蛋白阳性表达率依次降低,表明KISS-1参与胃癌的发生发展过程;胃癌组织中KISS-1蛋白阳性表达率随着浸润深度的加深逐渐降低,在转移组的表达低于无转移组,提示KISS-1蛋白低表达与胃癌浸润、转移有关。2.正常胃黏膜、癌旁非典型增生及胃癌组织中,MMP-9蛋白阳性表达率依次增高,表明MMP-9参与胃癌的发生发展过程;胃癌组织中MMP-9蛋白阳性表达率随着浸润深度的加深逐渐增高,在转移组的表达高于无转移组,提示MMP-9蛋白高表达与胃癌浸润、转移有关。3.正常胃黏膜、癌旁非典型增生及胃癌组织中,TIMP-1蛋白阳性表达率依次降低,表明TIMP-1参与胃癌的发生发展过程;胃癌组织中TIMP-1蛋白阳性表达率随着浸润深度的加深逐渐降低,在转移组的表达低于无转移组,提示TIMP-1蛋白低表达与胃癌浸润、转移有关。4.经相关性分析发现KISS-1、MMP-9及TIMP-1蛋白在胃癌中的表达具有显著的相关性,表明3者在胃癌的发生、发展及浸润、转移过程中可能起协同作用。