基于微反应腔阵列的寡核苷酸合成仪研究

来源 :北京大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:minini
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
基因工程因其在疾病诊断与治疗领域上的应用前景而备受关注。现代技术手段中,长度超过一千个脱氧核糖核苷酸单体的脱氧核糖核苷酸链(DeoxyribonucleicAcid,长链DNA)均由多种长度低于一百个单体的脱氧核糖核苷酸短链(Oligonucleotide,寡核苷酸链)通过聚合酶反应拼接而成。多数商用合成仪合成寡核苷酸链的方法是亚磷酰胺三酯法,其效率、产率均已达到相当高的水平,但合成通量小、单种产品产能过剩、价格居高不下成为重要的发展瓶颈。为此,本论文基于MEMS技术,提出了利用由微米级二氧化硅小球形成的蛋白石阵列实现高通量、产量适中、低成本的寡核苷酸链合成仪的方法。  本论文首先研究了高强度蛋白石芯片阵列技术,包括硅基微反应腔的设计原理与加工工艺,微米级二氧化硅小球在微反应腔中自组装形成蛋白石阵列的具体方法,将该蛋白石阵列烧结成高强度芯片的工艺条件,以及将该高强度蛋白石阵列模型化成微流道的具体原理。蛋白石阵列上的裂纹将影响液体流阻均匀性,使后续化学实验中流阻较小区域内的化学试剂难以交换。为提高该高强度蛋白石阵列的均匀性,实验重点研究了蛋白石阵列上的裂纹消除方法,包括原材料的预烧结处理、自组装过程中具体工艺条件的控制和烧结过程中具体工艺条件的控制,掌握了制备均匀的高强度蛋白石阵列的工艺条件,拓展了蛋白石阵列的应用范围。  基于此高强度的蛋白石阵列芯片,本论文开展了合成寡核苷酸链的研究工作,包括化学表面修饰烧结后蛋白石阵列的必要性和具体修饰方法,基于压电式喷墨打印机的高通量点样仪的设计与测试,亚磷酰胺三酯法合成寡核苷酸链的具体实验设计,合成的寡核苷酸链的检验与测试方法和结果的分析。根据以上实验设计,本论文现阶段已得到了一条长度为6个脱氧核苷酸的寡核苷酸链。本论文首先从多个方面分析可能导致产物不纯的因素,包括化学表面修饰蛋白石阵列的效果,无水、无氧环境的影响,蛋白石阵列固有的“面心立方”结构对合成效果的影响。本论文最后提出了提高单步产率的可能途径,包括无水、无氧环境的控制,芯片设计的新工艺方法等。  本论文的研究具备了微反应腔的典型特点,不仅拓宽了蛋白石阵列的应用范围,还为寡核苷酸链合成提供了一种新思路,可能应用于全基因合成、体外蛋白质合成等需要高通量、微量产物的场合,有希望加速微反应器合成寡核苷酸链的实际应用步伐。  
其他文献
石墨烯(Graphene)自2004年问世以来,因其稳定的结构、良好的导电和导热能力、透明和柔软的特性,逐渐成为了学术界和工业界的热点。目前,化学气相沉积法已经成为制备石墨烯的主流
随着集成电路的持续发展,越来越多的便携式电子设备成为了人们生活不可或缺的产品。在当前技术水平下,集成电路供电电压可能小于1V,所以,集成电路对其电源电压的要求尤为苛刻,使得
本研究应用二维凝胶电泳技术和蛋白质质谱技术等蛋白质组学研究方法对脱色希瓦氏菌S12偶氮呼吸条件下的细胞膜蛋白质组成结构特点及其功能进行探讨。分别对脱色希瓦氏菌S12在
MESFET微波功率器件是金属-半导体场效应晶体管,它有GaAs和GaN基器件,由于其优良的迁移率以及优异的高频、大功率、低噪声性能,越来越受到人们的关注,其应用范围也越来越广泛,在计
随着电动汽车产业的蓬勃发展,汽车电子系统与车辆信息变得越来越复杂。传统汽车仪表已无法显示电动汽车高级功能的状态,全液晶仪表应运而生。HUD抬头显示系统作为新兴车载装备,
如今,显示技术已渗透到生活的方方面面。当今主流的显示技术为有源平板显示(AMFPD)技术。多晶硅具有高载流子迁移率,基于多晶硅制作的薄膜晶体管(TFT)驱动能力强,易于与周边驱动
雪崩光电二极管(Avalanche Photodiode,APD)因量子效率高,体积小,不受磁场影响,工作电压低,可在室温范围工作等众多优点,使其被大量用于量子密钥、时间相关计数、成像、雷达探测、
微细电火花加工技术作为一种金属微细加工的手段,具有非接触,宏观作用力小等特点,越来越受到广泛的关注。然而微细电极的制备是微细电火花加工的重要瓶颈之一。本论文提出了利用
自LED面世半个世纪以来,技术日新月异。红光LED已经得到了长足的发展,内量子效率已经接近100%,而人们对还在孜孜追求着更高效率的红光LED。正是在这种背景下,更高亮度红光LED的研
本文对于死亡结构域蛋白超家族从分子进化角度,利用生物信息学的理论和方法进行研究。所有的数据来源均基于公共数据库,利用生物信息学方法对现有的数据进行了整理和发掘,试图对